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超临界co萃取红豆杉中紫杉醇的研究

摘要 摘 要 目前癌症已成为严重威胁人类健康的主要病症之一,由于癌症早期诊断的困 难,相当数量的癌症患者依赖药物治疗,因此进行抗癌药物的研究与开发是非常 必要的。药物治疗在肿瘤的根治中起重要作用,目前已经有很大进展,并日益受 到重视。紫杉醇是一种从珍稀植物中获得的具有独特疗效的抗癌天然植物产物, 因其独特的作用机理,成为新一代抗癌药物的代表,现已被多个国家批准应用于 临床治疗卵巢癌和乳腺癌等疾病。紫杉醇主要从红豆杉植物中用溶剂直接提取, 由于紫杉醇在植物中的含量普遍较低,红豆杉的生长又很缓慢,即使采用收获枝 叶的方法所能获得的原料也是非常有限的,因此,建立合理的提取方法以充分利 用植物资源非常重要。 超临界CO (scCO )萃取技术是近年来发展较为迅速的高新萃取、分离技术。 2 2 用scCO2萃取天然植物,具有较好的萃取、分离效能,并具有集萃取、分离、浓 缩为一体,整体操作成本低,无溶剂残留、无污染、节约能源、操作方便等优点。 传统中草药有效成分的提取一直采用醇提或石油醚提取等方法,这些方法效果较 差,操作不安全,提取能力差、有效成分损失严重、杂质多、质量不稳定,而且 难以保证疗效的充分发挥,更为重要的是容易造成药物污染、环境污染。而采用 scCO2萃取技术可以克服传统方法的缺点,操作可靠,分离效果极好,从天然药 植物中萃取有效成分,省时、用样量少、成本低、条件易于控制、不分解也不污 染样品。 本实验首先建立了检测红豆杉萃取液中紫杉醇的高效液相色谱法(HPLC), 从流动相、洗脱方式、温度等方面研究了HPLC检测红豆杉粗提物中紫杉醇含量 的条件,确定最佳条件为:柱温28 ℃,进样量20µL ,DAD检测波长227nm,流速 1mL ·min-1 ,使用流动相甲醇–乙腈–水(25 :35 :40 )洗脱22分钟,再用甲醇 –乙腈–水(50:49 :1)洗脱5分钟,最后用甲醇:乙腈:水=25 :35 :40洗脱7 分钟。然后,提出了一种乙醇-超临界CO2协同提取红豆杉树叶中紫杉醇的新方法, 系统的研究了scCO 萃取法提取紫杉醇的工艺条件,包括紫杉醇的粗提取剂,超 2 临界萃取压力、萃取温度、萃取时间等因素,确定最佳的紫杉醇粗提取剂为30% 乙醇,最佳超临界萃取温度为42.5 ℃,压力为30MPa,提取时间为2h 。在此最佳 工艺条件下,紫杉醇的相对提取率为127%,是传统工艺提取的1.27倍;纯度为 1.40%,是传统工艺提取的10倍以上,表明超临界萃取工艺优于传统提取工艺。 关键词:超临界萃取; 紫杉醇; HPLC 检测; 红豆杉 1 Abstract Abstract Nowadays, Cancer has become one of the main symptoms, which seriously threat human health. Because of the difficulties of early diagnosis, a significant number of cancer patients have to depend on drug therapy. Therefore, the research and development of anti-cancer drugs is extremely imperative. The drug therapy has been in great progress, and attracts much more attention gradually. From treatment to cure, drug therapy is playing an important role in practice. Paclitaxel is an important natural anti-cancer product with efficie

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