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1.右图是DNA结构模式图,据图所作的
下列推测不正确的是( )
A.限制性内切酶能将a处切断
B.DNA连接酶能将a处连接
C.解旋酶能切断b处
D.连接b处的酶为RNA聚合酶
解析:选D。以DNA结构为背景,考查与DNA有关的几种酶的功能。a处为磷酸二酯键,限制性内切酶能将其切断,DNA连接酶能催化其形成。b处为氢键,解旋酶能使氢键断裂,使DNA双链分开。RNA聚合酶的作用是连接脱氧核糖和磷酸,而b处是通过氢键连接起来的。
2.DNA连接酶的重要功能是( )
A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键
B.黏性末端碱基之间形成氢键
C.将两条DNA片段末端之间的缝隙连接起来
D.A、B、C都不正确
解析:选C。DNA连接酶的作用只是催化DNA片段的“缝合”,即恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,不能催化氢键形成,也不能使已有的DNA片段与单个的核苷酸之间形成磷酸二酯键。
3.(2011年四川广元高二检测)关于限制性内切酶的说法,不正确的是( )
A.限制性内切酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少分布
B.一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C.不同的限制性内切酶切割DNA的切点不同
D.限制性内切酶可用来提取目的基因
解析:选A。限制性内切酶主要存在于微生物中,每种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,因此不同的限制性内切酶切割DNA的切点也是不同的。
4.下列四条DNA分子,彼此间具有黏性末端的一组是( )
A.①② B.②③
C.③④ D.②④
解析:选D。黏性末端是用限制性内切酶作用产生的,限制性内切酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点切割DNA,产生两个互补的黏性末端。
5.(2010年高考浙江卷)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
解析:选A。构建重组DNA分子时,需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体,再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子,而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,所以A项错误。重组DNA分子形成后要导入受体细胞(若是植物细胞,则可导入其原生质体),若导入的受体细胞是体细胞,经组织培养可获得转基因植物。目的基因为抗除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力,可用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞。
6.(2011年高考海南卷)回答有关基因工程的问题:
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
在用表达载体转化大肠杆菌时,常用________处理大肠杆菌,以利于表达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成________,常用抗原-抗体杂交技术。
(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________________上。
解析:(1)限制酶能识别特定的DNA序列,并在特定位点上切割DNA,形成黏性末端或平末端;要使目的基因和质粒直接进行连接,应使用同一种限制酶进行切割,使二者产生相同的黏性末端。 (2)启动子为DNA序列,其具有RNA聚合酶结合位点,能启动转录,合成RNA;将基因表达载体导入大肠杆菌时,常用Ca2+处理;检测目的基因时,常用分子杂交技术检测目的基因或相应的mRNA,或采用抗原—抗体杂交技术鉴定相应的蛋白质。(3)用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,首先将目的基因导入农杆菌Ti质粒的T-DNA中,再利用农杆菌侵染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体的DNA上。
答案:(1)平 相同 (2)RNA聚合酶识别和结合的位点,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得所
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