共振瑞利散射法和荧光法分析测定天然植物性激素及分析应用的研究.pdf

摘要 共振瑞利散射法和荧光法分析测定 天然植物性激素及其分析应用研究 分析化学硕士研究生 黎小艳 指导教师 杨季冬教授 摘要 天然植物性激素在现代农业、水果生产及园艺作物的组织培养的应用及潜在 的抗癌药物开发中都具有重大意义。虽然已有的分析方法：UV法、电化学法、 HPLC法、室温磷光法及质谱法等对研究6．苄氨基腺嘌呤，激动素等外源性细胞 分裂素类物质与一些物质的相互作用提供了重要的信息，但是这些仪器昂贵，运 行成本较高，而大多方法需要加热降解，操作繁琐。因此在使用这些大型仪器的 同时，发展像RRS等仪器价廉、简便快速的方法来获取外源性细胞分裂素类物质 与一些物质相互作用更加全面、更加丰富的信息是一项很有意义的工作。 本论文在国家自然科学基金项目(No和重庆市教委科技项目 (No．KJlOl308)的资助下，对天然性植物激素的分析测定进行了如下几个方面的研 究： · 1．6．苄氨基腺嘌呤一铜(Ⅱ)-三苯甲烷类染料体系的吸收和共振瑞利散射光谱及 其分析应用 在pH 应生成螯合物，再与三苯甲烷类染料形成三元离子缔合物，其摩尔比分别为2：1(里 斯沙明绿)，3：1(固绿)，2．5：1(水溶性苯胺蓝)。反应体系的吸收光谱发生变化，其 共振瑞利散射光谱(RRS)和倍频散射(FDS)显著增强，三个体系的最大RRS峰 均位于372眦附近，6．BA浓度在一定范围内的增加与相应的I汛S强度(㈣， FDS(△而曲强度和吸光度(△彳)均成线性关系。其RRS检出限分别为5．48ng·mLq(里 斯沙明绿)，18．43 ng·mL’1(固绿)，9．34ng·InL‘1冰溶性苯胺蓝)。据此建立6．Bo气一 西南大学硕十学1市论文 快速测定，结果令人满意。此外，本文还应用了计算化学软件Gaussview3．07和 的电荷分布，并对里斯沙明绿体系的反应机理及RRS增强的主要原因进行了初步 探讨。 ． 2．Na2Ⅵr04-6．苄氨基腺嘌呤螯合离子与罗丹明6G的相互作用对共振瑞利散射 光谱和荧光光谱的影响及其分析应用研究 配位形成1：l的螯合阴离子【6．BA·W04】2。，它能进一步与罗丹明6G阳离子反应形 成三元离子缔合物，引起共振瑞利散射(RRS)急剧增强并产生新的RRS光谱，同 时溶液荧光急剧猝灭。体系荧光的最大激发(¨和发射波长(k)分别位于290 11IIl和559 nm，最大RRS峰位于316m附近。在一定范围内，散射增强(刖hs) 与荧光猝灭程度(△斥)均与6．BA的浓度呈线性关系。据此可建立RRS法和荧光猝 灭法测定痕量6．BA，在优化的条件下，两种方法测定6．BA的线性范围和检出限 分别为：0．05～15．00 pg·mL。1和8．2ng·mL。1(RRS)，O．50一15．00pg·mLq和17．0 ng·mLq(荧光猝灭法)，而RRS方法明显优于荧光猝灭法。本文重点考察了RRS 及荧光猝灭法适宜的反应条件和影响因素；用RRS法考察了共存物质的影响，表 明方法具有良好的选择性；并用于黄瓜与青椒中痕量6．BA的测定，结果令人满 意；本文采用密度泛函法，在B3LYP／6．3lG基组水平上计算了6．BA的电荷分布， 并对三元离子缔合体系的反应机理进行了初步探讨；利用偏振同步光散射信号， 讨论了离子缔合反应的同步光散射偏振度，从而分析了其共振散射光的构成并分 析了RRS增强的主要原因。 3．激动素诱导芳香族氨基酸的荧光光谱变化研究 本研究建立了一种灵敏度高、简便、快速测定痕量激动素的方法。采用荧光 oC～30 2．02～3．79 猝灭法研究了室温下(12 oC)，pH BR缓冲介质中激动素与芳香族 氨基酸一色氨酸、酪氨酸及苯丙氨酸相互作用的荧光光谱特征。三个体系标准曲 线的相关参数为：KT_．D．唧体系线性范围为0．025嵋肺L~2．8p咖L，相关系数 (力为O．9959、KT-．D．1姐体系线性范围为O．050pg／mL~2．5pg