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一些生物活性相物质的电化学和电生理生物传感器研究
串莓毒毒学拄术太学博士硪究生率盈论文: 串文摘要
中文摘要
本论文综述了垒物僮惑器中豹馘A传感器、辣禳过氧诧物酶传感瓣戳及轻
受体传感器相关的化学感受理论和实验方法,避骶秀鼹了多转以DNA、酶、媒
介体、神经递质、氨基酸和过氧化氢等为主鞭对蒙的生物传感器的系列研究。本
论文分两部分,第~部分包括;研究了DNA和神经递质肾上腺素的相互作用,
并通过龟化学氧化鬻蚀充蝤石墨电裰(碉黯GE)、碳纤束充蜡电极(M(舢ACE)
发溪了一秘嚣鼗双《A熬载方法,握警了三维露载翡嘏疆,势在毫摄豹壤充贪矮
和电极上修馋不同的物质两方联对该三维电极进行了研究。本论文的第三部分包
Americana下颚须整合受体组织生物传感器的仪
括:在已有美洲蜚蠊periplentita
器设备基础上,进行了部分改进工作,并对系列氨基酸的味觉传感响应进行了进
一步的磷究。
在DNA和神经递疆脊上躲素酌稆互作用的研究中,酋次发现了双链的
C苫,DN联小牛骢黥DNA)狂肾上腺素之耀鸯羞较强麴攘互馋攥,纛革链熬没鸯。
作用规理为肾上腺索分子搦入DNA的沟槽中,结合比例为1个肾上腺素分子与
12个DNA碱纂对。发现DNA吸附修饰的玻碳电极可以成为检测低浓度肾上腺
素的传感电极,因诧,这一方法为发袋神经递质的DNA探针提供了一个新的思
路。
僵是这穆l毅辩方法,霹辘会导致DNA在电校表瑟麓堆积昆较密集,这作为
DNA生物售愍器来说,会影响杂化。因北我钢邋过充蠢蜡嚣墨电极电化学氧讫
腐蚀制成微孔穴电极,此电极能在温和的条件下阐载解链的CT.DNA和合成的
15。merss.DNA。并且固载的ss.DNA的杂化效果很好。进一步探讨了氧化腐蚀
时间、固簸时闽对此传感器的影响,确定了优仡条件。并讨论了徽孔穴三维结构
中羚NA探铮器我黪霹麓撬理是;石篓魏穴箨五媾形戏熬三缭结构,使德ss.DNA
的~端可辘与孑L穴底部的蠢墨相接近,丽ss.DNA侧边的磷酸基团可能吸睢在石
蜡壁上。
由于石蜡填充在石墨电极中,不熄很均匀,致使这种孔穴电极的排布也很不
规则,可能会影响电极的性能。为了改善这种不均匀的状况,我们用1000根碳
一 生璺型堂垫娄查鲎堕主壁壅生竺些丝塞! 生奎楚墓
纾束,农碳纤周围充蜡,毒4作了碳纤.石蟥趣极,避嚣经过电化学疼蚀制成微孔
穴碳缛一石蜡毫极(M(h)AcE)。发现戴毫极表面更澈和,孔穴较规刚。Mf砩AeE
能更好的固载ss—DNA,并且保持其不变性,有很好的杂化能力。并对M陋)ACE
的割{乍、DNA固载和杂化的过程避蟹了条传最佐化。为了进~步扩展这种三维
毫极的鬣途,我们在电极的填充介璇和电极上修饰不同的物质两个方向上避行了
研究。发现M(h)ACE能很稳定地吸附亚甲蓝(M瞎),连续24小肘伏安扫描丽
峰电滤没褒明曼降低,因此可能戏为~秘褰性能、长寿会生物传感器的基础电极。
撬宙了三维固载的理论假设:MB可戳通过艽.7【键吸附于碳电极表面,并以其两
个-c地基团与石蜡壁借疏水亲和力发生吸附。在此基础上,通过戊二醚交联辣
攫过氧化物酶剑冬了姻黼费娃(婶ApcE,对过氧化氢害瞧好的催钝能力,弗曩
稳定往报好,避行了南4备条件的优亿。另一方面,邋过改变填充介质,制备了过
氧化氯电化学生物传感器(}碑R/M(h)AeCE),利用环氧树脂对生物大分子的亲
邪{生,改善了传统吸附辣摄涟戴纯物酶方法麴不稳定蛙积容爨馒夔失活携缺点。
在昆虫味觉圣枣经电生理学实验仪器设备驰纂础上,在显微实验样品操l乍套
上,设计掬工了恒溢装置,重新设计了记秉电极的挟持设备,掇高了信号重瑶褴。
对美测蜚蠊下颚须腹嚣感觉耄对氮基酸熬壤生理信号啕疲傲了送~步的职
究,发现对不同的氯基酸有不同的脉冲响应频率。依响应频率将氨基酸分成了三
类:响应频率最高的第一类为天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和脯氨酸,其次为第二
类包括缌氨酸、糖氮酸零爨苯疆氨酸,第三类为没有响应信号的包括秀氨羧、色氨
moiL‘
酸、酪氨酸和苏氨酸等。发现除了第一类氨鏊酸外,其它氨基酸在0.01
L~。对其识另4
浓度以下都记蒙不到响应信号,而第一类氮基酸的
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