固定化酶微流控片用于蛋白质组学的研究.pdfVIP

内容摘要 基于整体浇铸或氧等离子体表面处理技术，设计制作了集不锈钢管、 微通道于一体的聚二甲基硅氧烷(PDMS)微流控芯片。在此基础上， 发展了多种化学稳定、寿命长、活性高的PDMS微流控芯片固定化酶 TOF 新技术。将这些新技术用于微酶反应器的制备，实现了与MALDI MS和ESI MS的联用。因微酶反应器中使用了不锈钢包埋电极及可取 代毛细管喷头，因此克服了商用涂层毛细管喷头芯片与ESIMS在线联 用时寿命短的缺点。几种新的固定化酶技术总结如下： 1．利用紫外光照射PDMS表面产生的自由基反应，将丙烯酸共价键结 合在PDMS表面。然后，利用激活试剂1一乙基．3．(3．二甲氨丙基)碳二 亚胺(EDC)及N．羟基琥珀酰亚胺(NHS)的活化作用，将酶固定在 已修饰的PDMS微流控芯片通道中。 2．利用自由基反应和聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)在丙烯酸表 面的自组装作用，将酶固定在PDMS微流控芯片通道中。 3．发展了适合于固定化酶的铝溶胶一凝胶技术，利用铝溶胶．凝胶技术 将胰蛋白酶固定在PDMS微流控芯片通道中。 4．发展了适合于固定化酶的