EDR1,ED2在植物抗病中的作用研究.pdf

摘 要 稻瘟菌是水稻的主要病害之一，广泛分布于世界各水稻产区。目前，在分子 水平上对于稻瘟菌防治的研究，主要集中在克隆水稻抗性基因及稻瘟病病原菌无 毒基因。然而，鉴于水稻基因组相对较大，且稻瘟菌生理小种变异严重，导致对 于水稻防御稻瘟侵染方面的研究进展缓慢。edr1,edr2 为抗白粉突变体，且其防 御白粉菌的过程依赖 SA 信号途径。本研究通过将稻瘟菌生理小种 Y34 分别注射 拟南芥生态型 Col-0 及突变体 pen2, edr1, edr2, pad4, sid2, nim1, jar1, ein2, edr1/pad4, edr1/sid2, edr1/nim1, edr1/jar1, edr1/ein2, edr2/pad4, edr2/sid2, edr2/nim1, edr2/jar1, edr2/ein2，观察 edr1, edr2 及其它株系的抗性及生理反应， 为研究水稻防御稻瘟菌的分子机制提供理论依据。 取生长 4 周的拟南芥各株系，注射稻瘟菌生理小种 Y34 。3 天后，取各注射 叶片，做 DAB 及苯胺蓝染色，观察各株系叶片表面化学物质的积累情况。6 天 后，取各注射叶片，观察叶片病斑大小，以判断各株系对稻瘟菌生理小种 Y34 的感抗性。7 天后，取各注射叶片，台盼蓝染色，观察各株系叶片表面菌丝及孢 子生长情况，进一步验证各株系对 Y34 的感抗情况。 结果显示，拟南芥生态型 Col-0 对 Y34 敏感，突变体 pen2 及 edr1 对 Y34 的敏感程度比Col-0 更严重。edr2 及JA/ET 途径突变体对Y34 的敏感程度与Col-0 相当。SA 途径相关突变体pad4 及 edr1/pad4, edr2/pad4 的敏感程度低于Col-0， 而其他突变体表现为抗 Y34 。推测 EDR1 在拟南芥防御稻瘟菌侵染过程中起一定 正调控作用，而其作用依赖于 SA 通路基因 SID2 ，NIM1 参与。而 EDR2 在此过 程中的作用不明显或不起作用。 研究显示，许多模拟病斑突变体具有对病原菌的抗性。通过 EMS 诱变拟南 芥生态型 Col-0 种子，经过表型筛选，得到一些模拟病斑突变体，其中一株突变 体接种稻瘟菌之后，其病斑面积明显变大，推测该基因可能接到拟南芥防御稻瘟 菌的反应。同时，鉴于其感病表型与 edr1 类似，推测 edr1 在调控拟南芥防御稻 瘟菌的过程中，可能与该基因在有一定联系。 为进一步研究EDR1 在拟南芥防御稻瘟菌侵染过程中的调控机制，通过图位 克隆技术，发现该突变体是由于基因LIN2 突变引起。LIN2 编码类卟啉原Ⅲ加氧 酶(CPO)，是叶绿体和亚铁血红素生物合成途径中的关键酶。其调控拟南芥防御 稻瘟菌侵染的机制尚无相关报道。至于 EDR1 与该基因如何调控植物防御稻瘟菌 侵染过程有待进一步研究。 关键词：稻瘟菌，拟南芥，感抗性，信号通路，模拟病斑突变体，遗传转化 I Abstract Magnaporthe oryzae (M. oryzae), a hemibiotrophic pathogenic fungus can infect rice (Oryza sativa) and cause rice blast. The mechanisms involved in resistance of rice to blast have been studied extensively. However, it is difficult to investigate interactions between rice and M. oryzae because of the relatively large genome sequence of rice and the diversity of M. oryzae . edr1 and edr2 are mutants resistant to powdery mildews. A. thaliana plants (Col-0, pen2, edr1, edr2, pad4, sid2, nim1, jar1, ein2, ed