小麦苗期磷胁迫导紫色酸性磷酸酶基因和转录因子基因cDNA片段的克隆与分析.pdf

摘要 磷是植物生长发育必需的大量元素之一。它不仅是植物细胞的结构成分，而且在细胞的 代谢调控及信号转导中起重要作用。土壤中磷的总含量非常丰富，但有效磷浓度极低。因此， 借助现代分子生物学手段，筛选和利用低磷胁迫响应关键基因进行小麦磷高效基因型的遗传 改良，是实现磷资源可持续利用的必然途径。 本研究利用室内水培方法进行小麦苗期磷胁迫实验，利用比较基因组学的方法筛选小麦 磷胁迫诱导表达的紫色酸性磷酸酶基因和转录因子基因，并进行了初步表达分析，主要结果 如下： 1．小麦磷胁迫诱导酸性磷酸酶基因cDNA片段克隆与表达分析 根据同源克隆的方法，得到了1个新的紫色酸性磷酸酶基因eDNA片段，命名为： 达型，即在P+条件下，细胞中就有基因转录产物存在，随着磷胁迫时间延长，其转录产物 明显增加；TaPAP—like1和AK334325．J『在地上部和根系中均有诱导表达。但是，随着磷胁迫 降。说明在磷饥饿后期，小麦植株启动了其它拯救机制应答磷胁迫。 2．小麦磷调控转录因子基因cDNA片段克隆与表达分析 根据同源克隆的方法，得到了3个磷调控MYB家族类似转录因子基因cDNA片段，分 迫时间的延长，TaMYB．1ikel在根系中出现诱导表达，但地上部无诱导效应；而其原参照基 因OsPHR2在植株的各组织都有表达，但在根和叶中表达比较强烈。而且它在磷饥饿7d时 仍不受磷饥饿的诱导；TaMYB．1ike2在磷胁迫4d时，地上部有微弱诱导，但根部不显著；而 系及地上部均不显著；而其原参照基因AtMYB62在磷饥饿的叶中诱导表达。本研究运用比 较基因组学的方法获得的小麦磷调控基因与原参照基因的表达模式并不完全相同，对其基因 功能的深入研究可望为揭示小麦磷调控网络提供线索。 关键词：磷胁迫；同源克隆；紫色酸性磷酸酶；磷调控转录因子；半定量RT-PCR and of stressinduced cDNA—cloningexpressionanalysisphosphate from wheat genes seedling Supervisor：Prof．ZhengWenming Master(Ph．D)Candidate： WangMingfeng ABSTRACT oneoftheessentialmacronutrientsfor and is Phosphorus(P)is plantgrowthdevelopment．It not the of also an roleoncellmetabolismand cells，but only componentplant playsimportant Pis abundantin concengationofavailablePis signaltransduction．Althoughquite soil，the extremely P wheat and the low．Therefore，screeningefficiencygenotypesusing keygenes tolowP willbea to stress achievesustainableuseofPresources responsive necessaryapproach modemmolecular by biologicaltechnology． Our on wheatunder