尾矿废弃地优势物根际解磷菌的筛选、鉴定及其对植物生长的影响.pdf

中文摘要 磷是植物生命活动所必须的大量营养元素之一。大多数土壤缺磷，主要是土 壤中约有95％以上的磷素不能被植物直接利用。施加化学磷肥虽然增加了土壤有 效磷的含量，但是施入的磷肥常因与土壤中的一些游离的金属离子等结合而被固 定丧失其有效性。在一般情况下，磷肥的利用率仅为5-25％，因此，难溶性磷 向可溶性磷的转化对植物的磷素营养是十分重要的。在土壤磷素循环中，解磷微 生物承担着重要的角色，它可以将难性磷化合物、磷酸盐等不能被植物利用的磷 转化为可溶性磷，不仅提高了作物对磷的吸收率，促进植物的生长，而且在改善 土壤供磷性能方面起着极重要的作用。本文从安徽省铜陵市铜尾矿废弃地优势植 0-1、10之、1o-3、10r4、1 物木贼根际采集土样，按照1 o-5、10石、1∥7和lO罐稀释 涂平板方法，在29℃培养条件下，从NBRIP固体培养基上初步筛选得到多株解 磷菌，利用NBRIP液体培养基进行复筛，一些解磷微生物在不断地分离筛选、 纯化过程中失去或是降低了解磷能力，最终得到解磷能力较好的一株细菌B25 和一株真菌F4，解磷真菌的解磷能力要大于解磷细菌，且解磷活性保持的时间 较长。 运用分子生物学方法对解磷真菌F4、解磷细菌B25进行菌种鉴定，透射电 镜观察其形态特征。提取解磷真菌F4、解磷细菌B25的基因组DNA，分别对其 核糖体18SrDNA和16SrDNA进行基因的PCR扩增，将克隆、测序所得到的基 因序列登录GenBank进行同源性比对，分析表明解磷细菌B25的基因序列与 anthracisstrain GU297610(BacillusU13)、EF062509(Bacillussp．MCCB101)和 16SrRNAand16S一23S AM778997(Bacillusthuringiensisgene IGS)有较高的同源 性，相似度均为99％，确定解磷细菌B25菌株为芽孢杆菌属(Bacillus sp)的一 pullulans)有较高的同源性，相似度也均为99％，故确定解磷真菌F4为出芽短 梗霉类的一种霉菌。 探讨培养液pn值、菌体生长量与解磷菌的解磷能力之间的关系表明：在整 个培养过程中，培养液pH值的变化与解磷菌的溶磷量存在着有一定的负相关性， 中文摘要 且解磷真菌F4呈现出的相关性比解磷细菌B25更强；解磷真菌F4与菌体生长 量之间存在显著的正相关性，而解磷细菌B25的解磷能力与菌体生长量间缺乏 相关性。不同环境因子对解磷菌解磷能力影响的研究显示：解磷真菌F4的最佳 碳源是淀粉，最佳培养温度是30℃，最佳初始pH值是6．O；解磷细菌B25则分 别为葡萄糖、30℃和7．0。 将解磷真菌F4用于植物生长的盆栽试验研究，结果表明：接入解磷真菌F4 菌剂的植物高羊茅和草木樨在铜尾矿上生长90天后，与对照组(接入灭活的菌 剂)植株相比，植株的长度、生物量以及根、茎中总氮、总磷的含量都有一定程 度的增加。植物体内重金属总量与尾矿中有效态重金属的含量数据分析表明：对 照组和实验组之间存在一定的显差异性，接种菌剂一定程度上提高了植物对重金 属的吸收能力和尾矿中有效态重金属的含量。 关键词：解磷菌；解磷能力；18SrDNA；16SrDNA；植物生长；重金属 Ⅱ ABSTRACT in isoneofthe factorsinthelifeofthe ofsoil Phosphorus necessary plant．Most P about insoilcannotbe ourlandare 9