暗紫贝母组织培和快速繁殖的研究.pdfVIP

暗紫贝母组织培养和快速繁殖的研究 摘 要 暗紫贝母是我国特有的名贵中药材，其功效为清热散结，化痰止咳。因野生 的暗紫贝母多生长于海拔较高的地区，生长期长，资源缺乏。因而药用暗紫贝母 长期存在着供不应求的问题。本研究应用组织培养技术，以暗紫贝母鳞茎为外植 体，以MS 为基本培养基，探讨了不同生长调节物质及浓度对外植体的诱导效应， 建立了有效的暗紫贝母快繁体系。本研究力图在此方面作基础性和前期研究工 作，以便为工厂化生产的可行性提供技术依据。其结果如下: 1.外植体的消毒:以暗紫贝母鳞茎为外植体，最佳消毒方法是：75%乙醇浸泡15s ， 无菌水冲洗2-3 次，再用10%次氯酸钠浸泡20min，无菌水清洗5 次，此灭菌 方法效果最好。 2.初代培养: （1） 不定芽诱导的最佳培养基为：MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L （2 ） 愈伤组织诱导的最佳培养基为：MS+2,4-D1.0mg/L+NAA 0.5mg/L （3 ） 小鳞茎再生诱导的培养基为：MS+NAA1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L 3.不定芽增殖:增殖培养不宜连续三代以上在含不同浓度的NAA 和6-BA 培养基上 进行，最佳继代培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L 4 .生根结鳞茎培养：与暗紫贝母组培苗生根结鳞茎有关的影响因素有植物生长 物质的种类和浓度、糖浓度等；NAA 有利于生根，其较适合的浓度为0.1 mg/L ； 糖对结鳞茎作用较明显，较适合浓度为 1/2MS+NAA 0.1mg/L+糖30g/L 5. 移栽阶段：生根结鳞茎苗的移栽为:沙床的准备、炼苗和假植。移栽成活率为 90%。 关键词：暗紫贝母，不定芽，组织培养，快速繁殖 I Study on tissue culture and Micropropagation in Fritillariaunibracteata Kisao et K.C.Hisa Abstract Fritillariaunibracteata Kisao et K.C.Hisa is an important traditional Chinese herbal medicine ，often used for Clearing heat and depressing coughs ，expectorant.Due to natural Fritillariaunibracteata Kisao et K.C.Hisa mainly grow higher attitude region ,longer growth period,lacking of resources.so it exists long term inadequate supply. The study establish valid Micropropagation system of Fritillariaunibracteata Kisao et K.C.Hisa by tissue culture. their bulbs were used as explants in the medium of MS. Through different kinds of hormone and propotions to choose best medium for adventitious buds ,callus induction , regeneration induction of bulblet growth ,rooting and bulblet formation.This paper focuses on primary application and the initial research work, thus provided the evidence on the feasibility of industrialized production. The results are shown as follow