拟南芥基因LR1功能的初步分析.pdfVIP

摘要 Kinase RLK)属于跨膜蛋白家族，该蛋白的N末端位 植物类受体激酶(Receptor-like 于胞外，C末端具有胞内激酶区域，类似于动物受体酪氨酸激酶(如表皮生长凶子)。拟 南芥基因组测序的数据显示拟南芥中至少包括600个RLK同源序列，占据了大约2．5％的 已知拟南芥编码蛋白基因。其中富含亮氨酸重复的亚家族(Leucine．richRLK， Repeats 基因在植物生长调控及逆境胁迫应答方面均发挥作用。拟南芥中LRBl基因是LRR．RLK家 信号肽区、亮氨酸重复区、单次跨细胞膜区及细胞内激酶活性区。 结果显示lrbl．J『、lrbl．2这两种突变体中LRBl基因表达下调，非完全敲除。用0．5 p．M、1．0 gM、1．5gM的ABA处理各种研究材料的种子，发现萌发率无明显差别，暗示LRBl可能 不参与ABA对种子萌发的抑制过程。已知ABA可促进气孔的关闭，故在恒温条件下，测 定各植株的失水率，结果展示突变体LRBl失水率高于野生型及超表达植株。同时使用含 有10 gM 能参与了ABA对气孔的作用，该基因下调后，气孑L不能正常关闭。拟南芥网站预测该基因 在植株的根、茎、叶、花、花冠、果荚及顶芽等部位均有表达，我们通过构建LRBl：．pCMBIA 1381一GUS重组载体，对不同组织GUS染色，证实LRBI在拟南芥的多种组织中均有表达， 其中根、茎、叶的表达量最为丰富。用50 gM的ABA喷施GUS转基因苗，染色显示，随 达量是下调的。利用LRBl：：GFP融合蛋白的表达，展示LRBI蛋白定位于细胞质膜上。最 后，通过构建含GST标签的原核表达载体以及含c．myc标签的真核表达载体，进行了初步 的蛋白表达与纯化，为深入探讨LRBI功能奠定了基础。 关键词：拟南芥，ABA，类受体蛋白激酶，LRBl Abstr’act amino-terminalis Plant tothe oftransmembrane family proteins，the receptor．1ikekinase(RLKs)belongs in ownsanintracellularkinase issimilarto located the domain，which extraceilular,whilecarboxyi·terminal as showsthe theanimal kinasein factor．Recentdata structure，such growth receptortyrosine epidermal containsatleast600 RLK about2．5％ofknown Arabidopsisgenome homologoussequences．whichrepresents in ofthe Repeats encodingproteing