特异生境放线菌选择分离及新种鉴定.pdf

摘要 中文摘要 放线菌的次级代谢产物是一类重要的微生物药物资源。近年来，选择性分离 放线菌的方法学研究取得了显著成绩。基因筛选、培养基筛选、原位筛选等成为 当今研究的重要方法。虽然这些分离方法出发点不同，但是它们都为放线菌的新 药发现提供了宝贵的菌种资源。 本论文以厦门、云南、青海三地的植物根际土壤样品作为实验材料，采用了 能力的比较发现，聚乳酸(PLA)．明胶培养基比腐植酸培养基有更好的选择分离效 果。利用聚乳酸(PLA)．明胶培养基从11份根际土壤中总共分离得到85株放线菌， 根据16SrRNA鉴定获得除链霉菌属之外的稀有放线菌71株，稀有放线菌占所 有分离菌株的83％，分布于8个属中：马杜拉放线菌属口c砌D加口如朋)48株，野 野村氏菌属CⅣD，zo册姗船口)15株，假诺卡氏菌属(风P砌刀Dc鲫妣)3株，壤霉菌属 似grD，，l妒嘲l株，韩国生工菌属(鼢f66P砌)l株，伦茨氏菌属∞P玎纰口)1株，链孢囊 菌属(．跏印幻驴Dm愕f册1)l株，球孢囊菌属(5即础，．卸Dr口，彬“册)1株。同一批土样 的腐植酸培养基总共分离得到78株放线菌，其中稀有放线菌数为7株，稀有放 线菌数仅占总菌数的9％，分布4个属中。实验结果表明，聚乳酸(PLA)．明胶培 养基是一种分离马杜拉菌属等土壤稀有放线菌的良好选择培养基。 本文还发明了一种将平板影印技术与PCR扩增技术相结合从土壤中快速获 得具有安莎类抗生素产生潜力的放线菌的方法。根据安莎类抗生素合成途径中的 3．氨基．5．羟基苯甲酸合酶(越毋As)基因的保守性，通过放线菌的培养、影印、 检测方法，Xzqh．8菌株的代谢产物具有同格尔登霉素化合物同样的颜色反应。 平板影印与PCR技术结合的基因筛选，可作为某些特殊代谢特征的放线菌早期 鉴别的有效筛选方法。 本论文还对1株韩国生工菌属(鼢f66P砌)的稀有放线菌进行了形态特征、 培养特征、生理生化特性、化学分类和分子系统学研究。从表型、基因型和系统 198为韩国 发育三个层次比较分析，最终确定实验菌株的分类地位。菌株XMU 摘要 生工菌属内的一个新物种，命名为厦门韩国生工菌(盼f66P砌删缈脚柳。该鉴定 JourIlalof 结果已经在线发表于国际系统分类学杂志IJSEM上(Intematioml and SyStematiCEvolutiollary Microbi0109y，2011，doi：10．1099内s．0．033290一O)。 关键词：稀有放线菌；基因筛选：聚乳酸(Poly皿．蛔iI∽)；活性测定；多相 分类 Ⅱ Abstrad 英文摘要 AbStraCt Thereare mture many pmductswere泖arated丘om arethe sourceofcliIlical prodl-cts m萄or medicille，s0 mctdbolitesllavebcen collsidered硒ilIlportamIIlicroo唱锄iSmrcsources．Lately， llavemade Selectiveisohtionmethods great in删批lodsof progress，especially inshlaIldS0olL thesemethods gene—mmillg，Selecti