禾长蠕孢菌孢子产及其制剂加工研究.pdfVIP

摘要 gramineum 禾长蠕孢菌(Helminthosporium 自然感病稗草上分离得到的杂草生防潜力菌。耿锐梅等用禾长蠕孢菌孢子悬浮剂在田间进行杂草 10 防除试验发现3．0X7孢子／m2悬浮剂对稗草防效可达到85．2％，对稻田中的其它常见杂草也有 较强的致病作用并对水稻、小麦、玉米、棉花、油菜等主要作物安全。因此，禾长蠕孢菌具有开 发成真菌除草剂的潜力，其孢子可作为真菌除草剂的主要活性成分。然而，禾长蠕孢菌在大规模 生产中孢子产量较低，剂型加工技术困难，使其商品化受到限制。本研究对禾长蠕孢菌固态发酵 培养基和培养条件进行优化，期望通过条件优化将孢子产量提高到107孢子／克干物质以上。放大 发酵体系，保证孢子产量及质量基本不变，为工业化生产打下了坚实基础。制剂研制过程中，综 合评价助剂的分散力、稳定性、悬浮率以及与孢子的生物相容性，筛选出对禾长蠕孢菌孢子无毒 或毒性较小的助剂种类，并通过二次通用旋转组合试验优化助剂组合。期望通过剂型研究减少禾 长蠕孢菌孢子对结露期的依赖，刺激孢子萌发，提高毒力、扩散能力及粘着力，避免紫外损伤等。 剂型的成功研制决定了微生物除草剂的开发、登记注册和商品化。本文的研究内容及结果如下： 禾长蠕孢菌固态发酵产孢培养基及培养条件研究。以珍珠岩为底物基质，每100mL珍珠岩 (大约7．19)中添加49米粉、19豆粕粉、0．29NaaP04．12H20、O．19MgS04，水分添加量为40mL 光灯12h循环光照，诱导产孢。孢子最高产量可达1．12x107孢子／克干物质。 禾长蠕孢菌固态发酵扩大培养研究。扩大固态发酵体系，在大托盘上进行禾长蠕孢菌固态发 酵产孢试验，培养基组成按上述结果等比例扩大，培养条件采用优化后的条件。试验结果表明， 利用大托盘进行固态发酵的最高产孢量可以达到1．45x107孢子／克干物质。随后，用真菌孢子分离 器收集培养物中的孢子，并对所获孢子粉进行孢子质量检测。结果表明，孢子粉的含水量为 7％一8％，孢子粉的含孢量为3．02×107孢子／克，孢子萌发率基本在99％以上，说明扩大培养所获 得的孢子质量和孢子产量能够达到标准，可以作为剂型研究的原材料。 禾长蠕孢菌孢子制剂研究。研究发现珍珠岩粉末对菌丝体生长没有影响，孢子粉(曲：珍珠岩 粉末C酚的最佳混合比例为3：l。大豆油对菌丝体生长没有影响，按照孢子粉(蓟：大豆油(mL)为2：1 比例混合后，对孢子萌发有促进作用。在表面活性剂和稳定剂的筛选中，综合其分散力、悬浮率、 稳定性和生物相容性的影响，最终选择sP．20为表面活性剂，羧甲基纤维素钠为稳定剂。二次通 00 mL 用旋转组合试验优化出禾长蠕孢菌孢子制剂的配方为：1 g孢子粉中添力H339珍珠岩粉末，25 大豆油，49 SP-20，O．66 g羧甲基纤维素钠，lOg g增效剂A，2．6mL增效剂B。 关键词：禾长蠕孢菌固态发酵剂型微生物除草剂 Abstract a strain HelminthosporiumgramineumRabenh．￡sp．echinochloae(HGE)，ispathogenicfungus isolatedfromthe infected WaSfoundtobesafefor naturally bamyardgrassplant．HGE as such aestivum important L．)，wheat(TriticumL．)’maize(Zea crops rice(蛳sativa maysL．)， oilseed