荧光假单胞菌C1108的发光酶基因(luxAB)标记及其应用.pdfVIP

摘 要  Pseudomonas sp.CP1108 为分离自棉花根圈的解磷假单胞菌，经过 16S rDNA序 列比对，鉴定为荧光假单胞。通过三亲本杂交的方法将标记基因  luxAB  接合转移进  CP1108菌株，所得的标记菌株 CP1108L 具有发光活性和对 Str、Tet 和 Km三种抗生 ­5  素的抗性，转移频率为(4.65±0.01)×10  。将标记菌株经连续进行 20 次传代，均可检 测到发光现象。采用碱裂解法从 CP1108L 中提取质粒，证明 pTR102质粒已成功地转 移到 CP1108菌株中，并且发现 CP1108L菌株的部分生理生化特性、生长曲线和在土 壤中的存活能力并没有受到 luxAB基因导入的影响。 研究标记菌株在土壤中的存活情况，结果发现，在 0~42d 内，标记菌株在灭菌土 壤和不灭菌土壤中均能存活，总体呈现下降趋势，在灭菌土壤中的定殖水平稍高于不 3  4  ­1  灭菌土壤， 第 42d 时， 标记菌株的定殖密度约为 10