P53正向细胞凋亡调控因子抑制剂对肝脏缺血再灌注损伤保护作用.pdfVIP

生物物理学报 2014年 2月 第 30卷 第 2期：127．136 ACTABIOPHYSlCASINICAVo1．30No．2Feb．2014：127—136 www．cjb．org．ca P53正向细胞凋亡调控因子抑制剂对 肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 王 炎 ， 任子健 ， 王荣根 ， 胡菲菲 ， 程俊霖 ，一， 张正卫 ， 杨海元 ， 王 盈 ． 余 健 。， 戴一凡 1．南京医科大学江苏省异种移植重点实验室，南京 210029； 2．南京医科大学附属南京市第一人 民医院，南京 210006； 3．DepartmentofPathology,UniversityofPittsburghCancerInstitute，UniversityofPittsburgh Schoolof Medicine，Pittsburhg，PA 本文通过 绿‘‘色通道 ”投稿 (推荐编委：刘平生) 收稿 日期：2014．02—03；接受 日期：2014—02．20 基金项 目：江苏省异种移植重点实验室经费(BM2012116) 通讯作者：戴一凡，电话：(025E—mail：daiyifan@njmu．edu．cn 摘要：P53正向细胞凋亡调控 因子 (P53upregulatedmodulatorofapoptosis，PUMA)是Bcl-2家 族唯BH3结构域亚家族成员，位于线粒体 内，可被多种损伤 因素诱导激活。PUMA通过BH3结 构域与Bc1．2样抗凋亡蛋 白结合后发挥其促凋亡作用。PUMA抑制剂模拟蛋 白间的结合作用，阻 碍 PUMA 与Bc1．2样蛋 白结合 ，凋亡被抑制。在体 内，依小 鼠肝脏缺血、再灌注时间不同，损 伤情况各异。损伤较轻时，PUMA表达升高，PUMA抑制剂能够保护肝脏抵抗损伤 ；当损伤较 严重时，PUMA表达升高不明显 ，PUMA抑制剂的保护作用也不明显。综合上述，在一定程度 损伤的条件下，PUMA抑制剂可以有效地保护肝脏，减轻损伤。 关键词：P53正 向细胞凋亡调控 因子 ；凋亡；肝脏缺血再灌注；阿霉素；小 鼠胚胎成纤维细胞 中图分类号：R363 DoI：10．3724／SP-J．】260．2014．4003】 引 言 P53正向细胞凋亡调控因子 (P53upregulatedmodulatorofapoptosis，PUMA)是 Bcl一2 家族唯BH3结构域亚家族成员，于2001年被Yu等 1】【研究发现 。Bc1．2家族蛋白含有特有的 Bc1．2同源结构域 (Bcl一2homologydomain，BH11～4，其中，BH3结构域是与促凋亡相关 的结构域。PUMA位于线粒体内，它可以通过BH3结构域和所有Bc1．2家族抗凋亡蛋白结 合，抑制它们 的抗凋亡作用，这种蛋白间的相互结合也是启动凋亡杀伤过程的重要诱因[2]。 PUMA在正常情况下表达很低 [1]，但它可被多种因素诱导激活。射线[3_、化疗药物 等的基 因毒性损伤大部分是通过P53转录因子来调控PUMA[51；而生长因子或细胞因子撤除[6-0、癌 基 因蜊【、内质网应激 【叫等则通过P53以外的转录因子调控PUMA。PUMA被激活后移位到 127 生物物理学报2014年 第 3O卷 第 2期 线粒体膜上，促进膜外其它的Bcl一2家族促凋亡分子形成特殊孔道，线粒体基质内的一些凋 亡诱导因子转移到细胞质，促进凋亡反应的进一步发生_l1]。 肝脏缺血再灌注损伤可发生于缺血性休克微血管痉挛解除后、肝脏移植和肝脏血管再 通等条件下。肝脏缺血再灌注损伤可受缺血时间长短、有无侧支循环和再灌注条件等影响。 细胞凋亡是肝脏缺血再灌注损伤的重要原因，1996年有了关于肝脏缺血再灌注后细胞凋亡 的报道_】2]，后来，KohliE13】在大鼠体内证实了肝脏热缺血再灌注后内皮细胞和肝细胞的凋亡 增加。缺血再灌注损伤与PUMA表达升高关系密切，Wu等㈣证明了小鼠小肠缺血再灌注 后氧化应激反应激活PUMA，PUMA敲除后可有效减轻缺血再灌注损伤。Toth等 构建心 脏冷缺血再灌注模型，证明了