干旱胁迫下欧李苗的生理响应与差异蛋白表达分析.pdfVIP

Code：10225 University Code：S14549 Register Dissertationforthe of Master Degree The ofwater on stress and response physiological levelsinCerasus humilis proteomic seedlings Candidate： Zhou Lijuan Supervisor： A．Prof．SongXingshun Associate June，2014 Supervisor： Academic for： MasterofScience DegreeApplied Genetics Speciality： Dateof0ralExamination：June．2014 Northeast University： ForestryUniversity 万方数据 摘要 摘要 在干旱胁迫下，植物细胞通过干旱信号的感知和传导来调节基因表达，蛋白质变 化，从而引起形态、生理、光合作用、呼吸作用、抗氧化系统等各项指标的变化。本研 究以北京怀柔县引进的欧李(Cerasus humilis)种为实验材料，研究了2年生欧李幼苗正 常供水(对照)、轻度干旱、中度干旱胁迫3种供水处理条件下，光合、呼吸和抗氧化 系统等生理指标，同时对重度干旱胁迫下欧李总蛋白的表达进行分析，并通过RT-PCR 对14个参与光合作用和呼吸作用等的基因表达进行验证。主要的研究结果如下： l在干旱胁迫下，欧李叶片中主要以过氧化物酶(POD)活性的增强来提高植物对干 还原酶(GR)的活性均降低。欧李叶片总呼吸速率加强，交替呼吸和细胞色素呼吸两条电 子传递途径也发生改变。交替呼吸随时间的延长，速率升高，两细胞色素呼吸则呈现下 降趋势，这可能与植物细胞中水分的缺失有关。而可溶性糖含量的积累，有助于植物进 行渗透调节，缓解由于干旱给植物带来的伤害。 2成功构建出具有高稳定性和高重复性的欧李蛋白质双向电泳体系，得到高清晰 度，高分辨率，高重复性的双向电泳图谱。具体针对能影响欧李蛋白质双向电泳效果的 最适胶条pH范围、胶条承载量、等电聚焦时间以及SDS．PAGE电泳的运行条件等因 素，进行优化对比实验，确定了各因素的最优条件。我们比较了pH3．10与pH4．7范围 的胶条，发现在pH4．7上的胶条上的蛋白质点最为清晰、可靠。 3通过软件分析比对，干旱胁迫下的欧李蛋白质出现显著差异的点共有76个(变 行分析鉴定。 4根据蛋白质功能分类，我们将48个蛋