极长链脂肪酸与型糖尿病大鼠脑Aβ生成的关系研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………5 英文缩写……………………………………………………………………10 研究论文极长链脂肪酸与2型糖尿病大鼠脑AD生成的关系研究 —1厶—j—一 日U舌……………………………………………………………………11 材料与方法……………………………………………………………12 结果……………………………………………………………………25 附图……………………………………………………………………27 附表……………………………………………………………………3l 讨{念……………………………………………………………………33 结{仑……………………………………………………………………34 参考文献………………………………………………………………34 综述过氧化物酶体功能异常与阿尔茨海默病…………………………37 致谢…………………………………………………………………………51 个人简历……………………………………………………………………52 万方数据 中文摘要 极长链脂肪酸与2型糖尿病大鼠脑AB生成的关系研究 摘 要 目的：阿尔茨海默病(Alzheimer’S disease，AD)是一种慢性神经系统退 行性疾病，以进行性记忆和认知功能减退为主要临床表现。AD的特征性 病理改变为B．淀粉样蛋白(amyloidprotein，A13)在神经细胞外沉积形成老 年斑。AB是AD的主要致病因素。AD不仅是老年人常见的疾病，也是 糖尿病(diabetes 上添霜。因此，亟待弄清糖尿病病人高发AD的原因，找到干预措施。 基于以下两个事实：(1)报道显示，AD病人脑中极长链脂肪酸(very chain long fatty 毒性，可以导致细胞活性氧簇(reactive oxygenspecies，ROS)产生增多，氧 化应激增强。而氧化应激是目前公认的AD生成增多的重要机制之一。(2) 糖尿病是糖脂代谢紊乱疾病。我们假设，在糖尿病状态下，脂代谢的紊乱 会使脑中的VLCFA聚集，进而引起氧化应激，使A13异常生成增加，最 终导致认知障碍，糖尿病AD发生。 为了证实此假设，本实验用高脂饮食加小剂量STZ的方法诱导2型 糖尿病的大鼠模型，观察2型糖尿病大鼠的学习记忆情况，以及脑中Ap 鼠脑Ap生成中的作用，为预防及治疗糖尿病AD提供新的实验依据。 方法： 1实验动物 以本实验室侯连国等人制备的2型糖尿病大鼠的脑组织为实验材料。 实验动物分为对照组(Con)和2型糖尿病组(DMl。 2Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力 用上海吉量软件科技有限公司Morris水迷宫，采用定位航行试验和空 间探索试验，分别记录大鼠的平均逃避潜伏期、穿越原平台位置的次数和 第一次到达原平台的时间，以评估大鼠的学习记忆能力。 3ELISA检测脑组织A1340、BACEl的含量 万方数据 中文摘要 protein表示；脑BACEl的含量以ng／gg protein表示。 4实时定量PCR检测脑APP和BACEl的mRNA表达 以18S rRNA做内参，实时定量PCR测定APP、BACElmRNA的相对表 二4-且 怂里o 5免疫组织化学分析脑组织APP的蛋白水平 对大鼠脑组织石蜡切片进行免疫组织化学染色，分析APP的蛋白表 达水平。 6气相色谱分析脑组织VLCFA 提取各组大鼠脑组织脂肪酸，用日