蔡陵野生稻低温答基因OrCrl与OrCr2抑制表达功能分析.pdfVIP

摘要 茶陵野生稻是世界分布最北的两个普通野生稻居群之一，具有很强的耐冷 性。为了克隆其耐冷相关基因，采用水稻基因表达芯片分析了其低温诱导下的 转录组变化，鉴别出一些转录水平显著上调和下调的基因，基因芯片分析结果。 得到实时定量PCR分析结果的验证，OrCrl与OrCr2基因是从中筛选出的两个 耐冷候选基因。 为了探明这2个基因是否具有耐冷作用或其它作用，构建了两个由 杆菌介导法转入水稻日本晴中，分别获得了11株与13株独立的To代RNAi植 植株表达量都显著下调，表明干扰效果明显。用To代RNAi植株繁殖了足够的 Tl代种子，90％种子在添加了潮霉素的培养基上能正常发芽、成苗。对To、Tl 代RNAi植株进行了耐冷性等表型分析，结果如下： 生苗电解质相对渗漏率增幅较野生型日本晴小，但To代OrCr2基因RNAd植株 再生苗电解质相对渗漏率增幅较野生型日本晴大。 生苗叶绿素含量降低幅度与野生型日本晴无显著性差异，但To代OrCr2基因 RNAi植株再生苗叶绿素含量降低幅度较野生型日本晴大。 光合速率下降幅度较野生型日本晴差异不显著，但To代仂傩因RNAi植株再生 苗净光合速率下降幅度较野生型日本晴大。低温下To代仂雠因与OrCr2基因 幅更大。 6．2％，野生型日本晴幼苗存活率为 RNAi日本晴存活率分别为36．5％与1 12．5％；此外，OlCrl基因I矾Ai日本晴幼苗恢复生长时失水较慢。 5)非逆境条件下，To代OzCrl基因RNAi植株穗长、穗粒数、千粒重、 万方数据 结实率和株高明显低于野生型日本晴，To代OrCr2基因RNAi植株千粒重、结 实率也明显低于野生型日本晴。 以上结果说明：抑制OrCrl基因的表达量提高了水稻的耐寒性，抑制OrCr2 基因的表达降低了水稻的耐寒性，它们可能是耐冷相关基因，同时OrCrl基因 也可能与耐旱性相关。 关键词：茶陵野生稻；基因克隆；RNAi；耐冷性；功能分析 II 万方数据 ABSTRACT riceisoneofthetwowildrice whichexist wild polulations Chaling intheworldWi廿l coldtolerance．Inordertocloneitscold northernmost strong resistance-related ofitundercold gene(s)，aglobalgenomeexpressionprofiling 60K RiceGenome stresswas the GeneChip performedusing Some wereidentified．Thedataobtained up—ordown—regulatedgenes byGeneChip Wasconfirmedthereal—time PCR the up—or analysis by quantitativeanalysis．Among