PrxVI、SOD、CAT在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型脑内的表达变化.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………5 研究论文PrxVI、SOD、CAT在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型脑内 的表达变化 前言…………………………………………………………………10一刚吞……………“”………”………”……”…”“………一……一l 材料与方法…………………………………………………………11 结果………………………………………………………“”……”20 附图…………………………………………………………………22 附表…………………………………………………………………31 讨论…·…………………·………·…··………·……··……··……··35 结论···…··……·…………···………··…………··…………··……36 参考文献……………………………………………………………36 综述肝性脑病…………………………………………………………39 致谢··……………………···…··……··…··………·…·“··…一”“一““·51 个人简历…………………………………………………………………52 中文摘要 PrxVI、SOD、CAT在大鼠肝脏缺血再灌注 损伤模型脑内的表达变化 摘 要 肝脏不仅参与物质代谢，还具有分泌、排泄、解毒等重要功能。因此， 肝脏功能发生异常还会导致其他重要器官的代谢和功能受损如肝性脑病、 ischemia 肝肾综合征等。肝脏的缺血再灌注损伤(hepatic reperfusion 仅是导致肝功能衰竭，病人愈后较差的重要原因，还可使远端器官如心脏 处于高度氧化应激状态，导致心肌细胞遭受过氧化损伤。 氧化应激损伤是由活性氧族(reactive oxygen 化学性质非常活泼，可以破坏细胞内的重要结构蛋白和功能蛋白，并能改 变细胞膜的结构，从而影响细胞功能，甚至引起细胞和组织死亡。PrxVI 它在多种组织表达，其中肺和脑表达最多。研究表明PrxVI具有谷胱甘肽 过氧化物酶的生物活性，其功能主要是负责还原H202和磷脂过氧化物等。 超氧化物歧化酶(Superoxide CAT)也是机体内清除RoS的重要酶系，SOD能够清除02．．，而CAT主要 负责清除脂类代谢过程中产生的H202。 脑组织和心肌都是机体内对氧含量高度敏感的器官，当肝脏缺血再灌 等抗氧化酶的基因水平如何改变?未见报道。 本研究通过无损伤血管夹夹闭通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管 蒂30 min后松开血管夹，制造大鼠70％肝脏缺血再灌注损伤模型，然后观 mRNA表达水平及活性改变，探讨肝脏缺血再灌注损伤后脑内的氧化应激 状态以及PrxVI、SOD和CAT的抗氧化作用 目的： 观察大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型脑内的氧化应激水平以及PrxVI、 中文摘要 SOD和CAT抗氧化体系的表达及活性改变，探讨其在脑内抗氧化应激反应 中的作用。 方法： 1肝脏缺血再灌注损伤模型的制备及取材 肝血管和胆管蒂，以无创伤性血管夹夹闭通往肝左叶、肝中叶的血管和胆 管蒂。30分钟后去掉血管夹，恢复肝脏血液供应，制造70％肝实质的肝 脏缺血再灌注损伤模型。对照组大鼠只分离血管和胆管蒂并不夹闭。6小 时后收集血液，用于铷汀(丙氨酸氨基转移酶)测定；处死大鼠取肝脏和 脑，一部分4％多聚甲醛中固定进行HE染色，观察肝组织和脑组织的形态 学改变，一部分置于液氮中用于脑组织PrxVI、SOD和CAT mRNA水平、 蛋白水平、抗氧化活性和MDA含量测定。 2测定指标及方法 2．1HE染色观察大鼠肝脏和脑组织的形态结构 肝脏和脑组织经常规脱水、透明，石蜡包埋后，切片厚约5“m，苏 木精伊红