《鸡胚绒毛尿囊膜试验在评估表面活性剂及洗发香波刺激中的应用》.pdfVIP

维普资讯 分析与检测 品曼 五 19第99年1期2与 分析与检测鸡胚绒毛尿囊膜试验在评估 表面活性剂及洗发香波刺激中的应用 上海市，200082) 丁文m 、； (( (上海家化有限会一司宁 ， 摘要 鸡胚绒毛尿囊膜试验是一种较早就被采用的体外刺激性评估方法。利用孵化的鸡蛋肛胎中期血管化透明 的绒毛尿囊膜，将一定量被评估物质滴加在上面，在一段时问之后观察绒毛尿囊膜上的血管及其网络的形态结构、颜 色和通透性的变化，结合绒毛尿囊膜蛋白质性质改变判斯其受损程度，评估受试物的刺激性。对常用的根据血管充 血、渗血和蛋白凝固等指标评分作了相应变动．从毛细血管末梢的变化 整十毛细血管网变化 主血管和较粗血管的 改变和绒毛尿囊膜及其周日蛋白质的变化等角度更为全面地反映绒毛尿囊膜损伤程度。分别对不同浓度梯度的标准 刺激物十二烷基硫酸钠予以评翔，而受试物对绒毛尿囊膜的损失程度就用相对应的十二烷基硫酸钠浓度表示。国井 科研人员已对鸡珏绒毛尿囊膜试验结果与经典的动物IMalze试验结果的相关性作了较多的研究，这里我们主要与人 体皮肤封闭斑贴试验的结果进行等级相关的Spearman分析，两组表面活性剂原料的相关系数Rs分别是 0．536和 o．702，而市售香坡 (三种试验浓度)的结果则高达 0．847(PO．o1)，显示出良好的相关性。 关键词 表面活性荆 香波 刺激性体外试验 — — — — — 一 — 、 — — — — — — — — ～ 々 很久以来，人们都用体内皮肤斑贴的方法评判 妆品原料及其成品的皮肤刺激性，这些试验均 以动物 性剂原料实施鸡胚绒毛尿囊膜试验。预先将原料配置 和人体为对象。近年来，国际上关于保护生态环境禁 成相同的活性物浓度，再选取五种常见的市售洗发香 止实施动物试验的呼声 日益高涨，欧洲联盟甚至提出 波 (分别配成 2 、4 和 l0 三种浓度)进行鸡胚绒 实施动物试验的截止日期。而对于皮肤安全性尚不明 毛尿囊膜试验。同时在本公司科研部内部对十六种表 确的受试物直接实施人体皮肤斑贴又是不可想象的。 面活性剂原料分两次进行人体皮肤封闭斑贴试验，并 为此，欧美各大化妆品公司均致力于体外替代试验的 委托上海皮肤病防治所对标准刺激物十二烷基硫酸 研究工作。MartineCottin等提到了有关蛋白质含量 钠 (SLS)和三种浓度的市售洗发香波进行人体皮肤 分析、琼脂扩散方法和鸡胚绒毛尿囊膜分析等八种体 封闭斑贴试验。对应的人体试验的浓度均是体外试验 外试验方法，并研究了与经典的Draize试验结果的 的一半，对它们的共同结果用常用的等级相关的 相关性；其中绒毛尿囊膜分析的相关系数 Rs高达 Spearman分析 ，以评判两者间的相关性。 0．88，得出了是评判从无刺激至有刺激的物质十分有 1方法和结果 效方法的结论…。Luepke，N．P与Rougier，K／G等也 1．1 试验材料 提到鸡胚 绒毛尿囊膜试验(Het—CamTest)通过血管 1．1．1 鸡胚的孵化 的改变及蛋白质的相互改变可作为眼刺激反应的两 将从种鸡场购得的受精鸡蛋用湿布擦去污垢，置 个重要特征 “ 。此外，我们还发现欧美著名的化妆品 于 37℃恒温培养箱中，在培养箱中放一盆水以保持 原料公司，如德国的Hoechest公司和美国的Wicto 恒定的湿度，每天将鸡蛋沿长轴翻转 180。一次，整个 公司等均把诸如：红细胞溶血试验、血红蛋白变性试 培养过程中保持箱内清洁无菌。于第九天至第十天， 验、pH试验和Het—CamTest作为开发温和表面活 从鸡蛋的气室端剪开蛋壳，小心剥去蛋膜即露出血管 性