基因工程的常规技术_百替生物.pdfVIP

第三章 基因工程的常规技术 第一节 凝胶电泳技术 凝胶电泳 它是一种分析鉴定重组DNA 分子及蛋白质与核酸相互作用的重要实验手段，同时也是分子 生物学研究方法的技术基础。 用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。 本节主要介绍琼脂糖凝胶电泳技术。 一、DNA 的琼脂糖凝胶电泳检测 仪器 电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、移液枪 药品 Agarose 、 TAE buffer、EB （溴化乙锭） 上样缓冲液（6X ） 0.25% 溴酚蓝、0.25%二甲苯氰醇、40%蔗糖；水溶液4 ℃保存。 二、琼脂糖凝胶电泳基本原理 在电场的作用下，带有负电荷的DNA 或RNA 核苷酸链，依靠无反应活性的稳定的介质（琼脂糖 凝胶和聚丙烯酰胺凝胶）和缓冲液，以一定的迁移率从负极移向正极。根据核酸分子大小不同、构型 或形状的差异，以及所带电荷的不同，可以通过电泳将其混合物中的不同成分彼此分开。 DNA 分子的迁移速度与其分子质量的对数值成反比关系。 当用EB 对DNA 样品染色时，加入的EB 就插入DNA 分子中形成荧光结合物，荧光的强度与DNA 含量成正比，如果用DNA 片段的标准品作电泳对照，就可以估计出待测样品的分子