《自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义2016年论文》.pdfVIP

第38卷 第3期 2015年 6月 遵 义 医 学 院 学 报 Vo1．38 NO．3 JournalofZunyiMedicalUniversity Jun．2015 自身启动子调控 miR一7真核表达载体的构建及其意义 郭萌萌，廖珍媛，赵娟娟，陶弋婧，胡 燕，陈 超，秦娜琳，郑 静，徐 林 (遵义医学院 免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地，贵州 遵义 563099) [摘 要]目的 构建带有 miR一7自身启动子的miR一7重组真核表达载体 ，研究其对人肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影 响。方法 预测miR一7启动子序列 ，设计含有该序列和miR一7前体序列 目的片段的引物 ，PCR扩增后亚克隆人 pGL3．0 一 Basic载体以构建 miR一7自身启动子调控的真核表达载体pGL3．0一Basic—miR一7一promoter(命名为 P—miR一7一 pro)；将所构建载体转染人肺癌95D细胞 ，Real—timePCR探针法检测 95D细胞中miR一7的表达水平 ；MTT和克隆形 成实验分别检测95D细胞的增殖和克隆形成能力；划痕法观察9