白腐菌降解木质纤维素过程中清除自由基物质产生及研究.pdfVIP

摘 要 白腐菌是目前发现的对木质纤维素降解最有潜力的微生物之一 其在降解木质 纤维素过程中产生大量的羟自由基 OH 等活性自由基 以辅助木质纤维素降解 酶更好地发挥作用 白腐菌在此过程中能够很好地保护自身不受自由基的伤害 其 机理值得探讨 论文首先从四株白腐菌中选出具有较强生长优势 较高漆酶分泌能力及最佳清 除自由基物质产生能力的优势菌株A3 香菇属 Lentinus edodes 同时从三种秸杆 基质中确定玉米秸秆做为实验材料 初步构建研究体系 对降解过程中菌株 A3 胞外清除自由基物质的研究表明 在不同培养基上 菌 株 A3 胞外清除自由基物质的成分及其各自所占比重各不相同 在基础培养基中 胞外清除自由基物质的主要成分为胞外粗多糖 而在木质纤维素基质中 胞外多糖 及结合于其上的蛋白质仍是主要成分 但其整体所占比重有一定下降 且其中蛋白 质部分所占比重有所上升 在木质纤维素基质中 胞外还存在一些其它种类的清除 自由基物质 其与木质纤维素的生物降解有一定关联 对降解过程中菌株 A3 胞内清除自由基物质的研究表明 在不同培养基上 白 腐菌胞内清除自由基物质的主要成分均为胞内多糖及蛋白质 但其各自所占比重因 培养基而异 除了多糖和蛋白质 胞内还存在一些其它种类的清除自由基物质 其 在胞内清除自由基物质中所占的比重保持在15 左右 在同一种培养基中 菌株 A3 胞外多糖的产量明显大于胞内多糖 其清除自由 基能力也比胞内多糖强 胞内及胞外粗多糖在去除蛋白质后 其对羟自由基清除率均有一定下降 表明 粗多糖中的蛋白质部分在其清除自由基功能中起着较大作用 在木质纤维素基质中 菌株 A3 胞内外清除自由基物质的含量及其清除自由基 单位能力的变化与白腐菌胞外木质纤维素降解酶的酶活变化基本一致 木质纤维素 能够促进菌株 A3 胞内 胞外清除自由基物质的产生 而自由基清除剂硫脲能够在 较大程度上抑制这种促进作用 表明菌株 A3 胞内外清除自由基物质的产生与木质 IV 纤维素的生物降解以及培养环境中的自由基浓度之间有一定相关性 白腐菌在降解木质纤维素过程中产生清除自由基物质 其主要意义在于通过分 泌各种胞内及胞外清除自由基物质 如多糖 SOD 酶等 构建有效的胞内及胞外 防御体系 从而有效地防御木质纤维素降解过程中自由基对菌体自身的伤害 本论文首次研究了白腐菌降解木质纤维素过程中胞内外清除自由基物质的产生 情况 确定了白腐菌胞内 胞外清除自由基物质的成分 性质及其动态变化规律 进而对白腐菌降解木质纤维素过程中防御自由基伤害机制进行了初步探讨 具有一 定的理论和应用意义 关键词 白腐菌 木质纤维素 清除自由基物质 自由基防御 V Abstract White rot fungi are effective microbes that have strong potential to degrade lignocellulose now. They produce lots of activated free radicals such as hydroxyl radicals OH for helping ligninolytic enzymes to degrade lignocellulose better. White rot fungi can protect themselves from the damage of free radicals, the mechanism involved is worth studying. Firstly, preponderant fungus A3 Lentinus edodes was chosed from four white rot fungi, because it had better advantage in growth, b