肿瘤坏死因子简介.docVIP

肿瘤坏死因子 1975年E.A. Carswell等人发现接种卡介苗的小鼠注射细菌脂多糖后，血清中出现一种能使多种肿瘤发生出血性坏死的物质，将其命名为肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF)。八十年代人们发现其在消耗症中起了重要作用，又称恶液质素。TNF主要由活化的巨噬细胞，NK细胞及T淋巴细胞产生。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α，把T淋巴细胞产生的淋巴毒素（lymphotoxin，LT)命名为TNF-β。虽然TNF-α与TNF-β仅有约30%的同源性，但它们却拥有共同的受体。TNFα的生物学活性占TNF总活性的70 %～95 %，因此目前常说的TNF多指TNF-α。1984年TNF基因的克隆开辟了临床试验的时代，是第一个用于肿瘤生物疗法的细胞因子，但因其缺少靶向性且有严重的副作用，目前仅用于局部治疗。恶液质素（Cachectin） 巨噬细胞毒素（Macrophage cytotoxin） 坏死素（Necrosin ）细胞毒素(Cytotoxin)肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis factor-α)出血因子(Hemorrhagic factor)巨噬细胞毒性因子(Macrophage cytotoxic factor)分化诱导因子(Differentiation-inducing factor) 巨噬细胞(Macrophages) 自然杀伤细胞(Natural killer cells) T淋巴细胞(T-lymphoblastoid Cells) B淋巴细胞(B-lymphoblastoid Cells) 肥大细胞(Mast cells) 成纤维细胞(Fibroblasts) 平滑肌细胞(Smooth muscle cells) 乳腺肿瘤细胞(Breast tumor cells) 卵巢肿瘤细胞(Ovarian tumour cells) 星形胶质细胞(Astrocytes) L-929细胞(L-929 cells) 枯氏细胞(Kupffer’s cells) 上皮细胞(Epidermal cells) 颗粒细胞（Granulosa cells）人类TNF-α基因于1985年成功克隆，定位于6p21.4，长约3.6 kbp，有4个外显子和3个内含子，与主要组织相容性复合体（MHC）基因紧密连锁位于HLA-B 和 HLA-C2 位点之间的 MHC3 类基因区内，由TNFA和TNFB组成，分别编码TNFα和TNFβ。位于启动子区238位和308位存在单核苷酸多态性，被认为可调节TNF的转录水平，与慢性乙肝、自身免疫性疾病、胰岛素抵抗、肿瘤等多种疾病的易感性相关。TNF基因编码的mRNA约1.7 kbp，在其3`非翻译区有一段许多细胞因子都具有的保守TTATTTAT序列（AU富含元件，ARE）。 佛波酯是TNF的诱导剂，能通过靠近启动子区TATAA框的一小段序列诱导TNF的转录。1 人TNF-α前体由233个氨基酸组成（26 kDa），其中包含由76个氨基酸残基组成的信号肽，在TNF转化酶TACE的作用下，切除信号肽，形成成熟的157个氨基酸残基的TNF-α（17 kDa）。由于没有蛋氨酸残基，故不存在糖基化位点，其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。人类 TNF-α与小鼠 TNF-α有79%氨基酸组成同源性，TNF-α的生物学作用似无明显的种属特异性。最近有人报道通过基因工程技术表达了N端少2个氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具有更好的生物学活性和抗肿瘤效应。此外，还有用基因工程方法，将TNF-α分子氨基端7个氨基酸残基缺失，再将8Pro、9Ser和10Asp改为8Arg、9Lys和10Arg，或者再同时将157Leu改为157Phe，改构后的TNF-α比天然TNF体外杀伤L929细胞的活性增加1000倍左右，在体内肿瘤出血坏死效应也明显增加。TNF-α和β发挥生物学效应的天然形式是同源的三聚体。 2 人类TNF-β分子由205个氨基酸残基组成，含34氨基酸残基的信号肽，成熟型TNF-β分子为171个氨基酸残基，分子量25kDa。 3 人类TNF-β与TNF-α其DNA同源序列达56%，氨基酸水平上同源性为36%。应用X射线晶体衍射技术证明， TNF是由三个相同的单体亚单位组成的致密三聚体， 单体亚单位呈楔形，由β片层折叠形成β夹心结构(β-Sandwich structure)。1.1 TNF-R的分型 TNFR可分为两型 型TNF-R（又称TNFR1、CD120a、p55），439氨基酸残基，55kDa，其对应的mRNA有4.5Kbp，可表达于所有类型的细胞上，在溶细胞活性上起主要作用。 型TNFR（又称TNFR2、CD