5.3+胚胎工程技术专题.pptVIP

* 现代生物科技专题 胚胎工程的内涵 ——通常指对哺乳动物的排卵、受精、胚胎早期发育等过程进行的现代操作技术，主要包括：体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞等。 ——试管婴儿技术属于胚胎工程技术范畴，这项技术为那些想要子女却不能生育的夫妇带来福音 ——胚胎工程技术使哺乳动物的繁殖得以打破时间和空间的限制，为良种繁育和推广提供了快速有效的途径。 胚胎工程的诞生和发展 ——1890年，W.Heape在英国剑桥大学首次报道安哥拉兔早期胚胎移植（比利时兔为代孕母兔）成功，拉开胚胎工程的序幕 ——20世纪30～70年代，胚胎移植技术日渐成熟，1975年1月首届国际胚胎移植大会在美国召开 ——1951年，张明觉和奥斯汀(C.R.Austin)揭示精子获能的机理，并改进卵母细胞体外培养条件，被誉为“试管婴儿”之父 ——20世纪60～80年代，多种试管动物和试管婴儿相继问世，标志着胚胎移植进入成熟发展阶段。 ——20世纪80年代以来，胚胎分割、性别鉴定、体细胞克隆、转基因胚胎、胚胎干细胞等技术相继诞生，使胚胎工程技术得到充实和迅速发展。 胚胎工程技术知识结构 胚胎 工程 技术领域 理论基础 胚胎 干细胞 辅助 生殖技术 受精 作用 配子 发生 动物胚胎 发育过程 胚胎 嵌合 胚胎 移植 胚胎 分割 胚胎 体外生产 胚胎 性别鉴定 试管婴儿 培育工程 试管婴儿 研究现状 来源 分离培养 应用 胚胎工程的理论基础 1.配子的发生 ——精子生成过程 初级精母细胞2n 次级精母细胞n 精细胞n 精 子 n 增殖期 生长期 成熟期 变形期 有丝分裂 前减数 分裂期 减Ⅰ期 减Ⅱ期 减数分裂 精原细胞2n 精原细胞2n 一个细胞周期 卵原细胞 (2n) 初级卵母细胞(2n) 次级卵母 细胞(n) 2n 2n n 2n 排卵 形成透明带 合子 2n 受精 2n 初级卵母细胞(2n) 前间期 减2 减1 形成卵泡 胎儿期 卵原细胞(2n) 2n 有丝分裂 初情期后 ——卵细胞生成过程 2.哺乳动物的受精过程 成熟精子 获能精子 卵子 成熟卵泡 精卵相遇 壶腹部 精卵相识 精卵相触 质膜相融 激活卵子 精子入卵 减Ⅱ完成 皮层反应 精原核 卵原核 卵质膜重组 透明带硬化 原核融合 阻止多精入卵 排卵 射精 穿越放射冠 穿过透明带 顶体 反应 ——精子获能而激活 主要事件 诱发条件 雌性生殖道的分泌物（获能因子）刺激 获能反应 ①去除精子表面附睾蛋白和精浆蛋白，质膜胆固醇流失，暴露ZP结合蛋白； ②激活钙通道、耗氧量和糖酵解增加，pH升高，激活腺苷酸环化酶，cAMP含量升高，蛋白激酶A活化，精子活力增加； ③顶体酶原转化为顶体酶。 获能意义 ①透明质酸酶穿过卵丘细胞层，到达透明带； ②精子顶体区质膜表面的ZP结合蛋白与卵母细胞透明带发生识别； ③诱发顶体反应,为精子入卵准备 ——受精过程的图解如下： ①精子穿越放射冠，顶体表面卵结合蛋白与精子受体结合 ②释放顶体酶使透明带溶解，形成精子通道 ③精子穿过透明带，其膜蛋白与卵质膜上受体结合 ④精卵质膜融合，精子入卵，激活次级卵母细胞 ⑤卵膜下的皮层颗粒释放酶，引起透明带硬化和卵质膜重组 ——动物胚胎发育始于受精卵细胞分裂 ——受精卵的前5次细胞分裂在透明带内进行，称为卵裂期 ——哺乳动物的早期胚胎发育主要是指桑葚胚、囊胚和原肠胚的发育 3.早期胚胎发育的基本过程 器官建成 受精卵 桑葚胚 胚层 细胞分化 细胞 运动 胎儿 原肠胚 细胞 分裂 透明带内 子宫内膜 囊胚 着床 ——哺乳动物早期胚胎发育各期特征如下： 时期 发育特征 卵裂期 受精卵的前5次有丝分裂， 胚体不增加或略有缩小 桑葚胚 32细胞胚形似桑葚 每个胚细胞都属于全能细胞 囊胚 开始细胞分化，内细胞团的细胞体积大，沿透明带内壁扩展和排列；滋养层细胞小。出现囊胚腔，进而囊胚孵化。 原肠胚 胚体相继形成外胚层、内胚层和中胚层，内胚层围成原肠腔，滋养层发育成胎膜和胎盘 胚胎工程的技术流程 卵母 细胞 成熟 卵子 获能 精子 新鲜 精液 早期 胚胎 ES细胞 胚胎 移植 克隆 胚胎 去核卵 重组卵 受精卵 成熟培养 获能处理 体外受精 体外培养 核移植 试管 动物 克隆 动物 二分胚 早期 胚胎 滋养层 DNA分析 性别鉴定 分割 1.体外受精 2.胚胎的体外早期培养 ——配制受精卵体外发育培养液，培养液的成分有：有机物、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。 ——将受精卵移入发育培养液，继续培养至一定阶段 ——当胚胎发育到适宜阶段时，向受体移植或冷冻保存 ——胚胎冷冻技术包括冷冻和解冻 3.胚胎移植（牛） ——用激素促使供体母牛超级排卵 ——选择良种公牛配