转录及其盐离子浓度对质粒DNA的拓扑异构现象影响分析.pdfVIP

南开大学硕十论交 摘 要 DNA的超螺旋与DNA的复制、转录以及翻译等生物过程有着密切的联 系。同样，转录过程也能影响DNA的超螺旋情况。外界环境对于体内质粒DNA 的超螺旋也有作用，如温度、湿度、离子强度等都可以改变体内质粒DNA的 超螺旋密度。我们的工作在体外证明了转录Xi质粒DNA的超螺旋的影响，而 且证明了转录产生超螺旋与tetA基因的特定性质并无关系，对前人的转录模 型理论进行了补充。而且在工作中我们还发现了从拓扑异构酶I缺陷的Ecoli 中提取的质粒DNApBR322对于NaCl离子浓度梯度的反应明显不同于从拓 ，异卜构酶I野生型菌株DM410。中提取的质粒pBR322DNA.我〔门深‘入研究了 造成这种差别的原因，给出了我寸门自己的解释，说明了在两种情况下虽然都出 现高密度的负超螺旋，但是原因却是不同的。拓扑异构酶I缺陷的菌株中的质 粒的高的负超螺旋密度是由于topA缺陷造成的，而且，其之所以不随NaCl 离子强度的变化而变化是因为其体内的有补偿性突变的旋转酶对J几 [ATP]/[ADP]变化反应不敏感造成的。但是对于DM4100中的pBR322来说， 其在高盐浓度下之所以出现高的负超螺旋是因为[ATPHADP」比例过高的结 果。犷 关键词:C0录DNA超螺旋、