液相色谱手性分析条件的建立和优化.pptVIP

* * * * * hi * * * Here is the line up of main 4 columns. These “-H” means high-performance type and their particle sizes are 5micrometer, the others are 10micrometer. H types are improved version of general type. The size of general columns are 0.46cmI.D. x 25cmL, and the particle size is 10 micrometers. H types are both 0.46cmI.D. x 25cmL and 0.46cmI.D. x 15cmL, particle size is 5 micrometers. Sizes of columns for reversed phase are 0.46cmI.D. x 15cmL, particle size is 5 micrometers too. The features of H type columns are , 1st, high theoretical plate number. You can get sharp peaks and it is suitable for trace analysis. And because of the sharpness of H type columns, even if the length of columns are 15cmL theoretical plate number can be enough . 2nd, using 15cmL column, you can save your analytical time. I’ll show the data and chromatogram from now on. * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 串联旋光检测器的好处 2 */79 2. 可确认洗脱顺序 筛选结果示例　 　　　　　　　　 */79 样品： 信息１: 判别具有分离可能性的色谱柱 */79 信息2: 色谱柱和洗脱顺序 */79 AD-H vs OD-H、OJ-H的洗脱顺序相反 信息3: 醇的种类对分离的影响 */79 OD-H和OJ-H，用每种流动相均可分离。 AD-H，只有用乙醇才可分离。 分析条件的选择 */79 选择条件的要点 分离度 洗脱时间 峰形 对映体的洗脱顺序 若筛选没得到理想的分析条件时 */79 选择最接近基线分离的条件 调整流动相中醇的比例 调整流速 调整温度 变更为同种类长度为25cm的色谱柱。 尝试其他的色谱柱 应用组合筛选设备探索分析条件总结 */79 使用具有广普分离能力的的4种手性色谱柱 使用适合高流速的15cm的手性色谱柱 组合应用2种醇，考察其分离情况 和旋光检测器并用，可一次性获得更多的判断信息 内容提纲 */79 1. 手性HPLC分析条件的建立和优化 2-1 正相色谱 2-2 反相色谱 2. 手性色谱柱的自动筛选 3. 手性分析中的注意事项 */79 常见使用故障=溶剂错误 1 Daicel大部分手性柱是涂敷型产品，在市场上具有独特性。 若导入错误的溶剂(CH2Cl2、乙酸乙酯、甲苯等)，柱子会马上被破坏。 当流动相或样品溶液导入错误的溶剂时，柱压剧增，分离突然变差。 一旦错误地使用了溶剂，重新恢复柱子性能的可能性很低。 若您遇到此类分析故障，请对照出厂报告重新确认柱子的性能或与大赛璐联系 */79 常见使用故障=溶剂错误 2 Daicel正相手性柱的流动相和样品溶液不能使用水溶液 若不小心导入水，柱子不会彻底受损。 只需要使用色谱级无水乙醇低流速将水置换出来。 */79 使用前彻底清洗管路 将手性柱接入液相色谱仪之前 1.用异丙醇将HPLC所有管路彻底清洗。 2.用流动相将HPLC所有管路彻底清洗。 所有溶剂入口 泵 泵与进样阀之间 定量环 进样阀清洗液 进样阀与柱子之间 柱子与检测器之间 检测器 */79 压力 流动相或样品溶液过滤不彻底，固体颗粒堵塞管路或柱头，会引起柱压过高。 样品中成分在柱头析出或强烈吸附，会引起柱压升高。 流速过快，会引起柱压过高 每种柱子有特定的承压范围，请仔细参照相应的《色谱柱说明书》。 彻底过滤流动相及样品溶液。 样品预处理 更换流动相时，或者刚把柱子刚接上仪器的