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课件总结 结合课件复习 上海生科院2012年秋实验生物学课件总结[键入文档副标题] K-SICLS 2012/12/30   目录  TOC \o 1-3 \h \z \u  HYPERLINK \l _Toc345401431 基因工程抗体及其发展前景 孙兵  PAGEREF _Toc345401431 \h 1  HYPERLINK \l _Toc345401434 干细胞与重编程 金颖  PAGEREF _Toc345401434 \h 3  HYPERLINK \l _Toc345401440 药理学技术 王逸平  PAGEREF _Toc345401440 \h 5  HYPERLINK \l _Toc345401444 电生理 李澄宇  PAGEREF _Toc345401444 \h 6  HYPERLINK \l _Toc345401445 酶工程 杨晟  PAGEREF _Toc345401445 \h 7  HYPERLINK \l _Toc345401454 形态学技术 鲍 岚  PAGEREF _Toc345401454 \h 10  HYPERLINK \l _Toc345401456 共聚焦图像的??定量分析 于翔  PAGEREF _Toc345401456 \h 12  HYPERLINK \l _Toc345401457 实验动物与行为分析 金玫蕾  PAGEREF _Toc345401457 \h 13  HYPERLINK \l _Toc345401468 干细胞分化诱导技术 杨黄恬  PAGEREF _Toc345401468 \h 15  HYPERLINK \l _Toc345401474 基因治疗 梁旻  PAGEREF _Toc345401474 \h 18  HYPERLINK \l _Toc345401479 代谢工程与合成生物学 王勇  PAGEREF _Toc345401479 \h 21  PAGE \* MERGEFORMAT24 基因工程抗体及其发展前景 孙兵 图1 抗体的亚型 一.基因工程抗体的基本原理 图2 抗体的结构 Antibody has a higher specificity and affinity to bind to target protein 药物(drug)：是一类分子（化学合成物，蛋白质，核酸等）可以干扰人体内细胞生命过程中一些重要的生理和病理活动或通路。 基因抗体：通过基因工程手段，保留抗体重轻链可变区中主要与抗原结合的CDR（Complementary-determining regions）功能区, 而形成的各种功能抗体． 图3 基因工程抗体的分类 小分子抗体包括：（1）Fab片段（2）单链抗体（single chain antibody，scFv）、双链抗体、三链抗体（3）微型抗体（minibody，两个scFv与抗体CH3区连接）（4）双特异性抗体（diabody）（5）其他形式抗体（细胞内抗体、催化抗体、免疫脂质体、最小结合单位等） 抗体药物在应用中存在的问题：①一般必须用小鼠骨髓瘤制备单抗，故所得鼠源性单抗，必须人源化，在临床上可减少异源性蛋白所引起的过敏反应和增加疗效。②鼠源抗体人源化后，抗体效价明显降低，导致临床疗效降低。③临床治疗需要大量的抗体(克级），故需要生物反应器制备抗体。由于抗体的产量和质量受到限制，而影响疗效。需要工程细胞系和大规模生产工艺技术 基因工程抗体优缺点 优点：①不受动物品系（species)和抗体类型（isotype)的限制。②利用嵌合抗体，使鼠源抗体人源化，减少潜在的抗原表位，增强抗体的疗效。③全人源化抗体，可以降低抗体的异源性和免疫源性，最大化提升抗体的的疗效。 缺点：抗体的亲和力减弱，与完整抗体结构相比，功能明显降低。 抗体人源化的目的：①减小鼠源性成份，降低HAMS反应（human against mouse syndrome)。②易于大规模生产和应用于临床。③保留抗体的抗原结合能力。 基本原理：借助基因工程手段，将编码Ab的重轻链可变区基因重组到真核表达载体上并进行表达。 基因工程抗体的表达：①原核细胞和酵母可以用于表达小分子抗体和抗体片段。②大部分完整抗体和双链抗体、微型抗体等需要在CHO等哺乳动物细胞中表达。③利用完整的动植物体通过转基因的方法表达外源蛋白：如利用转基因烟草生产抗狂犬病毒抗体 抗体工程发展历程 ①动物多克隆抗血清（成分复杂副反应严重）被抗生素代替②杂交瘤技术制备单抗→鼠源单抗“魔弹”