《不同二步酶灌注法分离大鼠肝星状细胞的比较研究-论文》.pdfVIP

· 4806 · 现代生物医学进展 www．shengwuyixue．com ProgressinModemBiomedicineVoLI4 NO25 SEP2014 doi：10．13241j／．cnki．pmb．2014．25．002 不同二步酶灌注法分离大鼠肝星状细胞的比较研究木 张佳玲 张 峰 边康麒 王晖晖 诸葛宇征△ (南京医科大学附属鼓楼临床医学院消化科 江苏南京210008) 摘要 目的：在现有二步酶灌注法分离大鼠肝星状细胞(hepaticstellateceils，HSC)的基础上，探索更加高效的分离HSC方法。方 法：分别采用链酶蛋白酶+胶原酶循环灌注、链酶蛋白酶非循环灌注+胶原酶循环灌注以及胶原酶单独循环灌注法分离大鼠 HSC，比较三种方法的细胞获得率、活性和纯度差异。应用0．4％台盼蓝染色判断活性，结蛋白(desmin)、波形蛋白(vimentin)细胞 免疫荧光方法鉴定纯度。结果 ：链酶蛋白酶非循环灌注+胶原酶循环灌注法细胞获得率高于另两种方法，细胞活力高于链酶蛋白 酶循环灌注+胶原酶循环灌注法，三组得到的细胞纯度均高于9O％且无显著差异。结论：在三种二步酶灌注方法中，链酶蛋白酶 非循环灌注+胶原酶循环