《AGO1基因对拟南芥叶边缘锯齿状发育的影响》.pdfVIP

第 35卷第 1期 河 北 科 技 大 学 学 报 Vo1．35，No．1 2014年 2月 JournalofHebeiUniversityofScienceandTechnology Feb．2O14 文章编号：1008—1542(2014)01—0051—07 doi：10．7535／hbkd．2014yx01010 AGO1基因对拟南芥叶边缘锯齿状发育的影响 李素芬 ，赵 燕 ，冀芦沙 (1．聊城大学生命科学学院，山东聊城 252000；2．聊城大学农学院，山东聊城 252000) 摘 要 ：在拟南芥和水稻 中Argonaute(AGO)蛋 白是 RNA介导的沉默复合体 (RISC)的核心组 分，在植物叶极性的分化方面具有重要的调节作用。实验根据AGO／基因序列设计一对特异引 物，提取野生型拟南芥 RNA作为模板 ，采用反转录PCR方法扩增 出AG0z基 因，并插入到克隆载 体 pGEM-T 中。筛选鉴定后将 AGO1连接到植物表达载体 pBI121上，构建起植物表达载体 pB1121-AG0j。并且利用农杆菌介导的方法转化拟南芥 ，通过抗性筛选 ，获得转基 因植株 。然后 对转基因植株进行表型分析及 AGO1蛋 白的RT—PCR检测。通过对转基因拟南芥表达分析发现， 与野生型拟南芥相 比超表达AGO1蛋 白的转基因拟南芥叶片明显呈锯齿状，说明AGOj基因影响 拟南芥叶片发育 。 关键词 ：拟南芥 ；AGO1基 因超表达 ；agol突变体 ；叶片发育 中图分类号 ：O175．8 文献标志码 ：A InfluencesofAGO1tothedevelopmentoftheArabidopsis leaveswiththeserrationmargin LISufen ，ZHAO Yan ，JILusha (1．CollegeofLifeScience，LiaochengUniversity，LiaochengShandong252000，China；2．CollegeofAgricultural，Liaocheng University，LiaochengShandong252000，China) Abstract：InArabidopsisthanaliaandOryzasativa，Argonaute(AGO)proteinsarethecorecomponentsofRISCwhichplay importantrolesinmiRNA function，andAGO1encodesanRNA SlicerthatselectivelyrecruitsmicroRNAsandsiRNAs．Total RNA wasextractedfrom seedlingsofArabidopsisthanaliatoclonetheAGO1gene．TheplantexpressionvectorofAGO1was constructed (pBH21～AGO1)andtransformedintoArabidopsisbytheAgrobacterium—mediatedmethod．Inourresults，wese— lectedtheT1transgenicArabidopsiswithAGO1genebyKanamycinresistanceandRT-PCRanalysis．Accordingtothepheno— typeoftransgenicplants，wediscoveredtheincisedmarginofthetransgenicArabidopsisleaves． Keywords：Arabidopsisthanalia；AGO1overexpression；ago1；Leafdevelopment 叶是植物体的基本营养器官之一，在植物的生命活动 中起着重要作用，研究植物叶的发生、发育的分子 机理，是发育生物学的一个重要课题。叶片发育的阶段大致可分为叶原基的起始和叶极性的建立。叶原基 是在茎的顶端