姜黄素对Hepa1-6肝癌细胞凋亡及其ROS影响.docVIP

姜黄素对Hepa 1-6肝癌细胞凋亡及ROS影响( 杜琴，邓珊，沈克平，胡兵(( （上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科，中医肿瘤研究所，上海 20032） 摘 要 目的：观察姜黄素对小鼠肝癌Hepa 1-6细胞凋亡及活性氧(Reactive oxygen species， ROS)水平的影响。方法：不同浓度姜黄素处理Hepa 1-6肝癌细胞， MTT比色法检测细胞增殖，Hoechst 33258染色检测细胞凋亡形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡，Western Blot法检测活化型caspase-3， 2-7-二氯氢化荧光素乙二脂（DCFH-DA）染色法结合荧光酶标仪检测姜黄素对胞内ROS产生的影响利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测。结果：2～40 μmol/L姜黄素作用24 h、48 h均可抑制肝癌Hepa 1-6细胞增殖，并呈现一定的时间与剂量依赖性。5～20 μmol/L姜黄素作用48 h后Hepa 1-6细胞呈现凋亡形态变化，细胞凋亡率呈一定程度剂量依赖性，同时可检测到活化型caspase-3、以及ROS产生。结论：姜黄素可以抑制Hepa 1-6细胞增殖，促使Hepa 1-6细胞凋亡，可能与活化caspase-3及提高细胞内ROS水平相关。 关键词 肝癌；姜黄素；细胞凋亡；caspase-3