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生物必修三大题汇总 1.（15分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。 （1）进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。 （2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法有 、 。 （3）通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。 （4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。 答案：39. （1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）?（2）启动子； 终止子； 分子杂交技术； 抗原-抗体杂交技术（符合题意即可）?（1分）（3）TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）；? ? ?与干扰素基因特异性配对的DNA引物??（4）增大细胞贴壁生长的附着面积? 2．凝乳酶能凝固牛奶成奶酪，传统上凝乳酶只能从小牛的胃中提取，价格昂贵。1990年，美国辉瑞公司生产出了食品产业所需的第一个基因工程产品CHY—MAX牌凝乳酶，其化学组成与从小牛体内提取的完全相同，但其更加物美价廉。生产过程如下图，据图回答问题： （1）过程②中从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过 技术进行扩增，该技术的原理是 。 （2）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是图中过程 （填序号），在该过程中重要使用的工具酶是 。 （3）过程④中理想的受体细胞是大肠杆菌，该类生物具有的特点是 ，要想把重组质粒导入大肠杆菌，首先必须用 处理大肠杆菌，使其转化为 细胞，然后将重组质粒和大肠杆菌在缓冲液中混合培养完成转化过程。 （4）过程⑤将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后，能够准确表达的主要原因是 3、降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将能人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。 图2示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图显示的方法外还有 。 对图2中a点的操作方法为 。 获得的双链DNA经酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。 大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它__________________________________。 要进行重组质粒的鉴定和选择，大肠杆菌质粒需要含有_______________。 对符合设计要求的重组质粒进行酶切，已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。酶IDNA聚合酶 126 2. 从供体细胞的DNA中直接分离基因 用目的基因同一种限制性内切酶切割质粒，露出相对应的可进行碱基配对的DNA链1）繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少2）标记基因5. 4．（8分下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答： ⑴过程①和②必需用到的酶是?????????? 。 ⑵重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有??????????????? 才能构成一个完整的基因表达载体。 ⑶为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射??????? ?? 的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到______期即可通过显微操作将其细胞核去除。 ⑷早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及??????? 等物质。 ⑸如果想同时