高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊三七的含量.docVIP

高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊三七的含量 杨丽(包头中药有限责任公司 包头 014040) 摘要：冠心丹参胶囊为国家中药保护品种, 由丹参、三七、降香油三味组成，具有活血化瘀，理气止痛的药理作用，临床用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷刺痛、心悸气短；冠心病心绞痛见上述证候者。冠心丹参胶囊对冠心病病情轻度及中度者疗效较好安全、可靠，无毒副作用。 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验 仪器 固定相 BDS C18柱（250×4.6mm，5μm） 流动相 A相：50%乙腈，B相：水；按如下程序梯度洗脱： 时间（min） 0 12 110 111 A 45 45 72 45 B 55 55 28 55 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.4mg、三七皂苷R1 0.2mg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物，研细（过四号筛），取约1g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 阴性溶液的制备 取不加三七药材的本品,同法制成阴性对照溶液. 作者简介:杨丽 女从事中药研发工作 大学本科 学士学位 Tel:0472-4616327 Email:nmgbtyangli.@163 分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，阴性无干扰，色谱图见图1。 图1 2.2线性关系考察 配制含三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品各约0.2mg/ml，0.4mg/ml和0.4mg/ml的甲醇溶液，摇匀，精密量取2、8、12、16、20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积对进样量回归得标准曲线，结果见表2～表4。 表2 三七皂苷R1 HPLC法测定结果 进样量m（μg） 0.248 0.992 1.488 1.984 2.48 峰面积A（μv.s）μg范围内，峰面积与进样量线性关系良好, r = 0.9998。 表3 人参皂苷Rg1 HPLC法测定结果 进样量m（μg） 0.732 2.928 4.392 5.856 7.32 峰面积A（μv.s）μg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r = 0.9998。 表4 人参皂苷Rb1 HPLC法测定结果 进样量m（μg） 0.842 3.368 5.052 6.736 8.842 峰面积A（μv.s） 由表中数据可见，当进样量为0.842～8.842μg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9996。 2.3精密度试验 取含量测定项下对照品溶液，连续测定5次，记录色谱图，计算平均值及相对标准偏差，结果见表5。 表5 精密度试验结果 进样序号 三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 1 1811135 5960005 5503020 2 1846872 5965291 5567180 3 1885564 5927758 5503492 4 1895274 5983631 5503063 5 1889334 5920568 5510184 6 1891528 5936354 5494432 1869951 5948934 5513562 RSD（%） 1.81 0.41 0.49 2.4稳定性试验 取含量测定项下对照品溶液在8小时内连续进样5次，记录峰面积，结果见表6。 表6 稳定性试验结果 时间（h） 三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 0 1282317 4452185 4091090 2 1291923 4412037 4157922 4 1290174 4461713 4132040 6 1232249 4480327 4067056 8 1237525 4468378 4139860 1266838 4454928 4117594 RSD（%） 2.08 0.52 0.81 由表中结果可知，样品溶液在8小时内稳定。 2.5重复性试验 取一批样品（060516），取样5次，按含量测定项下方法测定，计算含量，并求RSD%。结果见表7。 表7 重复性试验结果 序号 三七皂苷R1（mg/g） 人参皂苷Rg1（mg/g） 人参皂苷Rb1（mg/g） 1 4.057 16.497 15.653 2 4.047 16.757 15.643 3 4.070 16.393 15.407 4 4.030 16.460 15.690 5 4.027 15.690 15.747 4.046 16.359 15.628 RSD（%