实时监测胶质瘤干细胞分化过程的实验研究.pdf

生堡挫丝处型苤圭!!!!生!旦筮j!鲞箜!塑g!i!』盟业塑些垡：坠e!!里!竺!Q!!：y!!：!!：塑!：! ·953· ．基础论著 实时监测胶质瘤干细胞分化过程的实验研究 梅鑫 陈银生 张洁 陈忠平 【摘要】 目的采用活细胞荧光成像技术连续观察胶质瘤干细胞向内皮细胞分化过程中多种 分子标记物的变化。方法研究运用活细胞荧光成像技术，对胶质瘤干细胞细胞株GSC一1的分化过 程进行12h动态观察。同时应用免疫荧光技术在三维培养0、2、6h行内皮细胞表面标记物CD34染 色，并通过光镜观察GSC—l的形态学变化。结果在三维培养下GSC—l细胞能形成管道样结构，部 分细胞表达内皮细胞标记物CD34，CD34阳性细胞数量随分化时间增长而增加(P0．05)，而细胞的 干性逐渐消失。活细胞荧光成像观察到同一视野下CD34阳性细胞数随诱导分化的时间推移而增 加；单个GSC—l细胞由CD34阴性细胞转变成为CD34阳性细胞的全过程。结论活细胞荧光成像技 术监测细胞分化过程得到与传统免疫荧光方法一致的结果，而且更直观、更精确，能长时间对单个细 胞追踪观察。 【关键词】神经胶质瘤；胶质母细胞瘤；肿瘤干细胞；细胞分化 ofreal-time of stemcelldifferentiationMei Experimentalstudy monitoringglioma processXin+， Chen fie，Chen of Yat—sen Cancer Yinsheng，ZhangZhongping．+DepartmentNeurosurgery，SunUniversity Center，Guangzhou510060，China author：Chen Corresponding Zhongping，Email：chertzhp@sysucc．org．cn Toobservethe in a ofmolecularmarkersinthe 【Abstract】objective changesvariety differentiationfrom stemcellstoendothelialcells livecellfluorescence process glioma using imaging MethodsLivecellfluorescence wasusedto the technique． imagingtechnique study differentiation of stemcellGSC—lfor observationof12h．Theimmunofluorescencewas processglioma dynamic staining usedto endothelial markerCD34 threedimensional cellsurface the cultureat0．2． periorm stainingduring and6h．andthe ofGSC-1wereobserved ResultsUnderthe morphologicalchanges bylightmicroscopy． form three—dimensionalculture．GSC—lcellscould tube—likestructures．Thenumberofsomecells