长链非编码RNA+HOTAIR对人胶质瘤细胞代谢和生长的影响.pdfVIP

·942· ．基础论著． 长链非编码RNAHOTAIR对人胶质瘤 细胞代谢和生长的影响 魏文金韩东风李海林张军霞张雅旋胡奇李文涛俞天赋尤永平 antisense 【摘要】 目的 探讨长链非编码RNAHOX转录反义RNA(HOX RNA， transcript HOTAIR)对人脑胶质瘤细胞代谢和生长的影响。方法采用荧光标记的小干扰HOTAIR(si—HOTAIR) 转染胶质瘤U87和U251细胞株，通过实时定量荧光聚合酶链式反应(RT．PCR)检测HOTAIR在胶质瘤 细胞中的表达水平；利用CCK8实验和克隆形成实验检测细胞的生长变化；采用海马生物公司糖酵解应 激实验和线粒体应激实验试剂盒检测细胞有氧糖酵解和线粒体功能。通过Westernblot检测有氧糖酵 解相关酶[包括葡萄糖-6一磷酸异构酶(GPI)、丙酮酸激酶M2(PKM2)及乳酸脱氢酶A(LDHA)]的表达 水平。结果荧光显微镜下观察U87和U251细胞中si—HOTAIR转染效率均90％。与阴性对照 胶质瘤细胞的增殖能力和克隆形成能力明显低于NC组(P0．01)；下调HOTAIR后，胶质瘤细胞有氧 糖酵解能力减弱，表现为基础糖酵解水平降低(P0．05)、最大糖酵解能力减弱(P0．叭)及糖酵解剩 HOTAIR后，胶质瘤细胞线粒体功能受损，与NC组比较，表现为基础呼吸水平下降(其中U87细胞P 0．01)、线粒体偶联效率降低及剩余呼吸能力减弱(U87和U251组均P0．05)。结论下调HOTAIR 表达可以使人胶质瘤细胞糖酵解能力和线粒体功能受损，同时影响胶质瘤细胞的生长能力。 【关键词】神经胶质瘤；线粒体；代谢；糖酵解；增殖； 长链非编码RNA；HOX转录 反义RNA RNA Influenceof HOTAmonhuman cellmetabolismand Wei longnoncoding glioma growthWenjin． Han Don舒Ceng，LiHailin，ZhangJunxia，ZhangYaxuan，吼研，LiWentao，Yurianf．，YouYongping． First Medical DepartmentofNeurosurgery，theAffiliated ofⅣn彬ng 210029，China． Hospital University，Nanjing author：You Corresponding Yongping，Email：yypl9@，咖M．edu．cn To theinfluenceof RNAHOX 【Abstract】0bjectiveinvestigate longnoncoding transcript antisense cellmetabolismand MethodsThe RNA(HOTAIR)onhuman甜ioma growth． fluorescently labeledsmall usedtotransfectU87andU25l celllines．Thereal．time interfering(si—HOTAIR)wasglioma chain usedtodetectthe levelofHOTAIRin reaction(RT—PCR)was cells． polymerase expression glioma