低温胁迫下茶树CsCBF1调控途径与功能鉴定初步及研究.pdfVIP

摘要 CBF(C—repeatbinding element transcriptionfactor／dellydrateresponsive binding 基因的启动子区上的顺式作用元件(CRT／DRE)，从而促进启动子中含有该调控元 件的多个脱水诱导和冷诱导基因的表达，激活植物体内多种抗逆机制。cBF是胁迫 应答过程中产生的调节性蛋白，脱水素则是与冷诱导相关的下游功能性蛋白。ICEl 游大量靶基因提高植物抗寒性。 蹈序列，进行半定量ImPCR，分析每种基因在冷诱导条件下的表达情况，初步推 测茶树的脱水素基因的肩动子中可能含有CRT／DRE顺式作用元件，其表达有可能受 到oCBFJ『的调控。 为了进一步验证茶树西∞FJ『基因抗寒功能，设计特异性引物扩增出口CBF，基 介导的叶盘法将构建的表达载体导入烟草中，获得大量抗性植物。 对抗性烟草进行PCR分析，鉴定外源QC职J基因是否导入并整合到烟草基因组 上转录表达，92％的抗性植物均扩增出目的条带。对PCR呈阳性的转基因烟草提取 在转基因烟草内得到了正常转录表达。取RT．PCR鉴定为阳性的转基因烟草组织进行