腺病毒介导IL-24基因诱导皮肤鳞状细胞癌细胞COLO+16的凋亡.pdfVIP

·论著· 腺病毒介导IL-24 基因诱导皮肤鳞状细胞癌 细胞COLO １6 的凋亡 马欣欣 张孟丽 李玲君 曹玉萍 吴秋菊 马鹏程 要】 目的 探讨腺病毒介导IL-24 基因表达载体（Ad-IL-24 ）对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）细胞COLO １6 【摘 的凋亡的影响，并探讨其作用机制。方 将构建的Ad-IL-24 腺病毒感染COLO １6 细胞，qPCR 法检测IL-24 基因的表达，MTT 法检测IL-24 过表达对细胞生长的影响，流式细胞仪检测IL-24 过表达对COLO １6 细胞凋亡的 影响，激光扫描共聚焦显微镜观察在IL-24 过表达后COLO １6 细胞凋亡的形态变化，Western 印迹检测Bax ，Bcl- 2 以及活化的caspase 3 蛋白水平，qPCR 法检测Bax、Bcl-2 基因mRNA 的表达，免疫荧光方法，检测IL-24 过表达 后Bax ，Bcl-2 的表达情况。结果 MTT 结果显示，Ad-IL-24 组的细胞从第4 天开始出现明显抑制，第6 天差异 最明显（P 0．05 ），并呈现时间依赖性，而Ad-GFP 组与对照组比较，差异无统计学意义（P 0．05 ）。流式细胞仪显 P 0．05 ） 示，Ad-IL-24 组的COLO １6 细胞凋亡率（１3．１0 ± 0．92 ）％ ，显著高于对照组（3．69 ± 0．36 ）％（ 和空载体组 （3．39 ± １．06 ）％（ ，后两组间比较，差异无统计学意义（ 。激光扫描共聚焦显微镜显示，Ad-IL-24 P 0．05 ） P 0．05 ） 组细胞加速凋亡。免疫荧光、Western 印迹法和QPCR 法结果显示，IL-24 过表达后Bax 在细胞中的表达明显升高， 而Bcl-2 在细胞中的表达却明显下降。Western 印迹法和qPCR 法显示，Ad-IL-24 组的Bax、Bcl-2 的蛋白及 mRNA 水平分别与对照组和空载组比较，出现了明显的上升和下降，在蛋白水平上产生与抗cleaved caspase 3 抗 体结合的特异性条带。结论 Ad-IL-24 可诱导鳞癌细胞COLO １6 细胞凋亡，其机制可能与上调Bax 基因、下调 Bcl-2 基因表达，并活化caspase 3 有关。 【关键词】肿瘤，鳞状细胞；白细胞介素24 ；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 ；COLO-１6 Adenovirus-mediated IL-24 ge ne expression induces apoptosis in a human squamous cell carcinoma cell line COLO 16 Ma Xinxin, Zhang Mengli, Li Lingjun, Cao Yuping, Wu Qiuju, Ma Pengcheng． Institute of Dermatology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Nanjing 2１0042, China Corresponding author: Ma Pengcheng, Email: mpc8１5@１63．com 【Abstract 】 Objective To investigate the effect of adenovirus-mediated IL-24 （Ad-IL-24 ）gene expression on the apoptosis in a human squamous cell carcinoma cell line COLO １6, and to explore the underlying molecular mechanism． Me