粗毛栓菌atp9基因克隆、原核表达进化分析.pdf

png川师范大学硕士论文 粗毛栓菌atp9基因的克隆、原核表达 及进化分析 生物化学与分子生物学 专业 研究生 司文洁 指导教师 王一丁 雍彬 摘要：粗毛栓菌作为一种白腐真菌，可以有效地降解自然界中广泛存在的 木质素，在环境保护和资源再生领域都有着相当广泛的应用前景。在生物 体内，ATP合酶是能量代谢的关键酶，参与生命体中的多种光合磷酸化以 及氧化磷酸化反应。其中atp9基因的功能是负责编码ATP合酶A亚基上 的第9亚单位，是编码ATP合酶基因的重要组成部分，这部分基因片段的 功能与呼吸作用和光合作用有相当密切的关联。由于atp9基因在进化过 程中高度保守，本研究根据已知近缘真菌的基因序列，设计并合成了一对 引物，由粗毛栓菌的mRNA反转录从而得到cDNA，以此第一链作为模板， 利用PCR技术得到粗毛栓菌的编码部分ATP合酶的atp9基因的完整序列， 并将其连接于已处理好的原核表达载体上。此后进行了一系列的测序与进 化分析的结果表明：该克隆片段全长222个碱基对，一共编码了73个氨 基酸，其翻译的蛋白质的分子量为7