内毒素对人牙周膜细胞表达TLR2与TLR4的影响.pdf

…………………………………··l …………………………………··4 的影响 …………………………………·8 ………………一………………··9 缂i果………………………………………………………………………………………………．13 5 附图……………………………………………………………………………1 附表………………………………………………………………．……………………………。24 ≠乎L论……………………………………………………………………………………………………………………………25 结论……………………………………………………………………………………………………………………………．30 1 参考文献………………………………………………………………………3 综述 jj致谢………………．……………………………………………………………………………………………………………………．．．．4．4． 个人简历……………………………………………………………………………．45 中文摘要 内毒素对人牙周膜细胞表达TLR2和TLR4的影响 摘 要 目的：Toll样受体(Toll．1ike 的一员，主要存在于免疫细胞的表面。TLRs属于I型跨膜受体及病原体 的模式识别受体是白细胞介素一1受体超家族成员，可以识别病原体所特有 association 的保守结构，这种保守结构被称为病原相关分子模式(Pathogen molecular 炎症反应起始于TLRs对抗原相关分子模式的识别，引起细胞内信号传导， 从而引起细胞因子分泌，启动炎症反应。 越来越多的研究证实，TLR2和TLR4与牙周疾病的发生、发展密切相 关，有着重要的临床意义。口腔内存在大量的细菌，牙周病是以革兰氏阴 性厌氧菌为主的混合感染，内毒素是革兰氏阴性菌死亡破裂后由细胞壁外 膜释放出的具有特殊结构的物质，是牙周致病菌的主要毒力因子，可穿过 上皮进入深部的结缔组织。牙周膜细胞(Periodontalcells，PDLCs) ligament 是牙周膜内的主要组织细胞，具有较强合成胶原的能力，对牙周组织健康 的维持以及牙齿的稳固十分重要。 牙周膜细胞是否可以作为免疫细胞参与局部牙周免疫反应成为学者 们关注的热点。本实验旨在探讨体外培养的人牙周膜细胞是否表达Toll样 受体2,114，以及观察在不同的时间段内毒素刺激对牙周膜细胞表达TLR2 和TLR4有何影响，以了解Toll样受体在牙周病中的免疫学作用。 方法： 1于临床上取得12．26岁患者因正畸拔除的双尖牙，无菌湿润条件下 刮取根中三分之一的牙周膜组织，采用传统组织块法进行人牙周膜细胞的 原代培养，运用第三代细胞进行免疫组织化学染色，通过波形蛋白和角蛋 白染色鉴定细胞来源。 2选用第四代生长良好的处于对数生长期的牙周膜细胞，制成 4×104／ml的单细胞悬液接种于96孔板内，每孔体积200ul，共铺7板，每 板复种三孔，并设未加细胞的孔调零，运用四唑盐比色法 中文摘要