腺病毒%2f甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径免疫效力比较.pdfVIP

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2015-11-23 发布于安徽
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腺病毒%2f甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径免疫效力比较.pdf

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IIIIIIIlUIIIIIPIIIIIII IIIIIIII} Y2588209 本课题得到国家高技术研究发展计划(863计划) “家畜病毒病基因工程疫苗创制课题资助 11AA10A208) (项目批准号No．20 英文缩略表目录中文摘要………………………………………………………………………………………．I Abstract……………………．…………………．…．……．……．……………．．………………………．…………………．．II 1引言………………………………………………………………………………………………………………1 1．1猪瘟和猪瘟病毒…………………………………………………………………………．．1 1．1．1猪瘟……………：…………………………………………………………………………一1 1．1．2猪瘟病毒…………………………………………………………………………………1 1．2猪瘟疫苗研究进展………………………………………………………………………．．3 1．2．1传统猪瘟疫苗……………………………………………………………………………3 1．2．2核酸疫苗…………………………………………………………………………………4 1．2．3病毒活载体疫苗…………………………………………………………………………6 1．2．4猪瘟亚单位疫苗…………………………………………………………………………8 1．2．5猪瘟合成肽疫苗…………………………………………………………………………9 1．2．6猪瘟病毒基因缺失弱毒疫苗……………………………………………………………9 1．2．7嵌合瘟病毒疫苗………………………………………………………………………．10 1．3腺病毒／甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗………………………………………………11 1．3．1腺病毒／甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗的构建及其免疫原性分析………………12 1．3．2腺病毒／甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗系统评价…………………………………12 1．4疫苗免疫途径研究进展…………………………………………………………………13 1．4．1肌肉注射………………………………………………………………………………．13 1．4．2皮肤注射………………………………………………………………………………．14 1．4．3黏膜免疫相关途径……………………………………………………………………．15 1．4．4其他免疫途径…………………………………………………………………………．17 1．5研究内容与目的意义……………………………………………………………………17 2材料与方法………………………………………………………………………………．．19 2．1实验材料…………………………………………………………………………………19 2．1．1疫苗、细胞、毒株和抗体……………………………………………………………19 2．1．2实验动物………………………………………………………………………………．19 2．1．3主要试剂、仪器设备…………………………………………………………………。19 2．2方法…………………………………………………………………………………………………………………．．20 2．2．1动物分组、免疫与攻毒………………………………………………………………．20 2．2．2阻断ELISA……………………………………………………………………………20 2．2．3血清病毒中和试验……………………………………………………………………．20 2．2．4猪外周血淋巴细胞分离………………………………………………………………．21 2．2．5猪瘟病毒灭活…………………………………………………………………………．22 2．2．6淋巴细胞增殖试验……………………………………………………………………．22 2．2．7细胞因子ELISA检测…………………………………………………………………22 2．2．8荧光定量RT-PCR……………………………………………………………………一23 2．2．9组织病理学检查及免疫组化试验………………………………………………