小麦叶色突变体蛋白质组学相关基因表达及研究.pdfVIP

摘 要 为材料，采用蛋白质组学及基因表达调控分析方法，探索Mt6172叶色突变的分子机理。 主要研究结果如下： 合体、ATP合成酶、卡尔文．本森循环和抗氧化机制的部分组成亚基或组装蛋白。其中 有87．1％的差异蛋白质定位于叶绿体，并且有64．5％参与光合作用。 成酶和NADPH脱氢酶复合体的部分组成亚基或组装蛋白。其中有51．9％的差异蛋白参 与光合作用，并且有40．7％定位于叶绿体类囊体膜的光反应途径。此外，通过多次改进 优化实验，建立了一种小麦叶绿体分离和叶绿体蛋白提取方法。 3、分析叶绿体差异蛋白中的13个定位于类囊体膜上的光反应蛋白基因的表达调控 一j 模式，发现在正常光周期下，几乎所有光反应蛋白基因在突变体中都表现下调，这与 2D—DIGE结果一致。但在前质体分化过程中，大部分基因却表现不同程度的上调，表明 在不同生长条件下光反应相关蛋白编码基因的表达调控模式有可能不同。 4、叶绿素荧光动力学参数测定结果显示，将突变体及其野生型暗培养两周后见光， 随着见光时间的增长，野生型光合能力逐渐恢复，而突变体只在见光后期表现极其微弱 的光合能力，接近于零。野生型的PSII活性随光照逐渐增强，而突变体的PSII活性基 本检测不到。说明见光后，突变体中类囊体膜结构形成受阻，导致类囊体膜上的光反应 复合体组建失败。 以上试验结果表明，Mt6172叶绿素缺失突变是一个极其复杂的过程，突变体类囊 体膜上的光反应蛋白复合体的缺陷可能是导致突变的重要原因，本研究为阐明空间诱变 小麦叶绿素缺失突变的分子机理奠定了理论基础。 aestivum 关键词：小麦(TriticumL．)叶色突变体空间诱变双向差异凝胶电泳技术 (2D．DIGE)叶绿素荧光动力学参数实时荧光定量PCR(qPCR) In Abs订act Proteomics and wereusedtocharacterizea approachgeneexpressionanalysis wheatmutant derived Mr61 from chlorophyll—deficient 72，which spaceflightmutagenesis， withitswild H61 orderto abetter oftherevealthe compared type 72，in get understanding molecular ofleafcolor mechanism mutantioninMt6172． Themainresultswereas following： 2D—DIGEandMALDI—TOF／MSontotal of leaf 1．Through analysis proteinseedling betweenmutantMt6172anditswide H61 were type 72，62 differentiallyexpressedproteins them50 and12 62 identified，amongproteinsdown-regulated proteinsup