野生和栽培大豆苗期根尖解剖结构蛋白表达差异.pdfVIP

摘要 摘 要 本文从实验室前期研究的大豆材料中，按照地理位置、生态型尽可能 丰富的原则，选取野生大豆、栽培大豆地方品种和育成品种，研究这三个 不同进化程度大豆群体苗期根尖解剖结构及蛋白质表达的差异，探讨蛋白 表达差异与解剖结构差异间的关系，为揭示驯化育种过程中大豆根系的变 化机理、发掘控制根系进化的关键基因奠定基础，主要结果如下： 1、选取黑龙江、山东、江苏、四川、云南、广西等6 个省的野生大豆、 栽培大豆地方品种和育成品种各一份共18 份材料，将种子置吸水纱布上萌 发后种植于蛭石中，27 度光照生长 3 天，取根尖伸长区与成熟区交界处横 切制作石蜡切片观察解剖结构。野生大豆、地方品种和育成品种根尖解剖 结构均为典型的双子叶植物根初生结构，分为表皮、皮层、维管柱三层， 在组成上没有明显差异。对野生大豆、地方品种、育成品种根的直径、维 管柱直径、皮层细胞层数三个指标进行差异显著性分析，发现栽培大豆在 这三个指标上均显著高于野生大豆，表明栽培大豆与野生大豆相比，根的 吸收、运输和支撑能力显著增强。 2 、选取野生大豆41 份，栽培大豆44 份，育成大豆44 份，按上述方 法种植后取根尖（0.8cm ），各品种等比例混合的方式制成野生群体、地方群 体、育成群体三个样品，双向电泳分析蛋白质表达的差异。每样品电泳 4 次共获得12 张双向电泳图谱，样品各重复实验获得的双向电泳图谱匹配率 达80%。ImagMster6.0 软件分析每张图谱上平均有蛋白点769 个，以相对灰 度值（%Vol ）为指标，按Ratio 值大于1.5 的标准在三个群体间筛选差异表 达蛋白点，同时用单因素方差分析（P0.05 ）以及LSD 多重比较分析（P0.05 ） 检验，在三个群体间找到38 个差异表达的蛋白点，占总蛋白点数的4.94% 。 采用质谱方法分析38 个差异表达蛋白，均获得了良好的峰图，NCBInr 数据 库比对成功获得了35 个差异蛋白的相关信息。 3、对35 个获得了NCBInr 数据库信息的蛋白质进行生物信息学分析。 通过Phytozome 、ExPASy、UniProt 、MODBASE 、Pfam 、Panther 、KOG 、 KEGGORTH 等数据库预测了 35 个蛋白质的空间结构及可能的功能。结果 发现，野生大豆和栽培大豆苗期根尖差异表达蛋白大多数与能量代谢有关， 参与NADP(H)相关的氧化还原反应、三羧酸循环、电子传递链等过程。与 II 万方数据 摘要 之相互印证的是，采用GO 分析发现，野生大豆和栽培大豆苗期根尖差异表 达蛋白可能的编码基因分子功能大多被归为“结合”、“催化”，参与的生物 学过程大多被归为“细胞过程”和“代谢过程”。野生大豆和栽培大豆苗期 根尖解剖结构的差异与这些差异表达蛋白以及能量代谢的关系还有待进一 步研究。 关键词： 大豆；根尖； 解剖结构； 差异表达蛋白； III 万方数据 摘要 ABSTRACT