荔枝皮中多酚物质的提取和其抗氧化性研究.pdfVIP

荔枝皮中多酚物质的提取及其抗氧化性研究 周文 巫建东 （中山大学化学与化学工程学院 应用化学） 摘要：本实验采用微波辅助提取法和超声辅助提取法提取荔枝皮中的多酚，利用UV 、 HPLC 测其含量，并用加标回收法验证它的含量。同时用DPPH 法来测定荔枝皮提取物总 多酚的抗氧化性能。实验表明微波和超声可高效完成提取，提取物具有很好的抗氧化性。 关键词：荔枝皮 多酚 抗氧化 紫外可见光谱 1. 引言 荔枝中含有丰富的荔枝多糖、黄酮、氨基酸和人体必需的微量元素，具有滋补作用和 药用价值，是水果中的珍品，有果中之王之美誉。其根能消肿止痛，用于胃脘胀痛。果肉 则益气补血，用于病后体弱、脾虚久泻、血崩。而荔枝核能够理气、散结、止痛、鞘膜积 液、睾丸肿痛、胃痛、痛经。荔枝皮一直被大众所忽略，但研究表明其中富含具有良好抗 氧化和抗自由基性能的多酚类物质。1 多酚化合物的提取分离方法多种多样。经典的提取方法主要是有机溶剂提取法，这种 提取方法不需要特殊的仪器，应用较为普遍，但存在着产品安全性低、耗时长、提取率低 等缺点。随着科学的进步，一些以先进仪器为基础的新型提取方法，如超声波提取、微波 辅助提取、生物酶解提取、超临界液体萃取和膜萃技术等，以其高效、节能、环保等优 点，得到起来越广泛的应用。 本实验针对作为废弃物的荔枝果皮，分别采用微波辅助提取法和传统的溶剂回流提取 2 法提取荔枝皮中的多酚类物质，通过红外、紫外、液相色谱 、薄层色谱研究多酚类物质 的组成和含量，同时开展荔枝果皮中多酚类物质的抗氧化性能研究。 2. 实验部分 2.1 仪器与试剂 仪器有旋转蒸发仪，紫外-可见分光光度计，微波萃取仪，高效液 相色谱仪，色谱柱ODS-C18 （4.6 mm*150 mm ,5 μm ）, 电子分析天平（0.1 mg ），碘缸，便 携式紫外灯及一般实验室常用仪器。 试剂有新鲜荔枝皮或干荔枝，硅胶GF254 ，羧甲基纤维素钠 （CMC ），95% 乙醇（分析 纯），碘化钾，碘，氯化钠，乙酸，苯酚，浓硫酸，氯仿，正丁醇，甲苯，葡萄糖，Tris- HCl 缓冲溶液，硼酸-KOH 缓冲溶液，福林酚试剂，表儿茶素，儿茶素，没食子酸，槲皮 素标准品，Fe3+-三吡啶三吖嗪，DPPH ，色谱纯甲醇，乙腈，二次蒸馏水。 2.2 实验步骤 微波辅助提取法：准确称取烘干的洁净荔枝皮样品3.0 g，加入30 mL 95% 乙醇溶液，在600W 微波功率、50℃下提取15min 。其中，微波剂量、提取时间和 固液比等参数可根据实验条件加以优化选取。过滤并在50℃下减压浓缩到干，得到荔枝皮 的乙醇提取物E2 ，称量计算提取率。平行两次实验。 超声波震荡辅助提取法：准确称取在60 。C 烘干的洁净荔枝皮（桂味）2.0 g ，置于碘 量瓶中，加入30 mL95%乙醇（再瓶口磨口处垫上一片纸，防止超声后塞子与瓶口黏在一 起），利用超声波震荡30 min 。抽滤并用少量95%乙醇洗涤两次，再用95%乙醇定容至50 mL 备用，平行两次实验。 Folin-Denis 法测定荔枝皮中总多酚的含量：（1）没食子酸储备液（100 mg/L）配置： 准确称取10.0 mg 没食子酸标准品，溶解后定量转移至100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻 度，摇匀备用。（2 ）样品溶液的制备：准确移取2.5 mL 提取液至50 mL 容量平中，用水稀 释至刻度，摇匀备用。（3 ）标准曲线绘制：取7 支10 mL 具塞比色管，准确移取没食子酸 使用液（100 mg/L）0、0.40、0.60、0.80、1.20、1.60、2.00 mL，加入1.2 mL 福林酚试 剂，摇匀后静止5 min，再加入3 mL5% 的碳酸钠溶液，用水定容至10 mL，充分摇匀，室 温下避光放至30 min，于644 nm 波长下测定标准系列溶液的吸光度，绘制标准曲线。 （4 ）样品中总多酚含量的测定：准确取1 mL 样品（微波辅助提取与超声辅助提取）溶液 至10 mL 具塞比色管中，加入1.2 mL 福林酚试剂，摇匀后静止5 min，再加入3 mL5% 的 碳酸钠溶液，用水定容至10 mL，充分摇匀，室温下避光放至30 min，于644 nm 波长下测 定标准系列溶液的吸光度。平行两次实验。