拟态弧菌ompU多表位基因设计、表达及免疫特性分析.pdfVIP

摘要 由拟态弧菌(Vibriomimicus)引起的腹水病是水产动物常见的、危害严重的细菌 性疾病之一。由于目前尚无商品化的拟态弧菌疫苗可供水产动物使用，养殖基层控制 该病的手段主要是依赖抗菌药物，但是随着抗菌药物的反复使用，细菌产生耐药性， 抗菌疗效不明显，常导致患病动物大批死亡，给水产养殖业带来了严重的经济损失。 因此，开展新型高效的拟态弧菌疫苗的研究迫在眉睫。本研究选择拟态弧菌外膜蛋 B细胞表位和优化设计多表位串 白OmpU为靶标，应用生物信息学软件筛选OmpU 联基因的基础上，通过基因克隆表达技术获得重组多表位蛋白，研究其免疫特性，以 筛选出有效的多表位串联肽，为研制拟态弧菌多表位疫苗奠定基础。 首先，应用DNAStar软件，联合采用多种不同方法综合分析拟态弧菌外膜蛋白 OmpU的二级结构、柔性区域、亲水性、表面可能性和抗原指数，筛选其优势B细 胞表位。7个优势B细胞表位以丙氨酸．丙氨酸．酪氨酸(AAY)接头进行不同顺序串 程技术服务有限公司合成多表位串联基因ompUepis并构建重组质粒 pUC57．OmpU2epis(即2拷贝OmpUepis)。 并进行原核表达。根据pAML