藏系绵羊三种促毛生长因子基因的克隆及其营养差异对其mRNA表达的影响.pdfVIP

中 文 摘 要 藏系绵羊又称为藏羊，是我国三大原始绵羊品种之一，主要分布在高寒牧区，青 海是主要产区。藏系绵羊被毛纤维粗长，毛质细腻且保暖性好，是制造床毯、地毯等 的良好原料。羊毛的生长本身就是各种生长因子或激素相互作用，共同促进毛囊生长 的结果，本研究以IGF-Ⅰ、VEGF和HGF三种基因为研究对象，从自然放牧的藏系绵羊 所产1月龄羔羊皮肤样本中提取了总mRNA，依据GenBank中普通绵羊的基因序列，设计 特异性引物，分别扩增了表达IGF-Ⅰ、VEGF和HGF三种生长因子的功能基因，并对所 扩增出的基因进行了克隆和序列分析；另外，还采用实时荧光定量PCR技术SYBR Green I荧光染料法，对妊娠后期藏系绵羊进行营养补饲后，就其所产羔羊体内的IGF-I、VEGF 和HGF基因mRNA的表达水平进行了相对定量分析。 本研究取得了如下结果： 1.成功克隆出了藏系绵羊VEGF 基因全长CDS共573bp、IGF－ⅠcDNA序列共940bp 和HGF 基因cDNA 的部分序列，长度为 108bp。经序列比对后发现，所研究的这三个基 因与普通绵羊、山羊、牛、马、猪、人、鸡、鸭、大鼠和小鼠等物种之间具有高度同 源性，其相似性在 100%至74.2%之间，其中藏系绵羊与普通