125OH2D3对系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞亚群的免疫调节作用及其临床意义.pdf

1 万方数据 目录 一．中文摘要………………………………3 二．英文摘要…………………………………5 三．中英文缩略词表……………………………………………..…...7 四．正文…………………………………………………………8 1.前言……………………………………………………………8 2.材料与方法………………………………...………………10 2.1.研究对象…………………………10 2.2.主要试剂及仪器…………………………………11 2. 3.外周血单个核细胞分离12 2.4.T 淋巴细胞分离和培养………………………………13 3.实验步骤……………………………15 4.统计分析……………………………17 5.结果…………………………………………18 6.讨论…………………………26 7.结论………………………………35 五．参考文献………………………36 六．致谢…………………………………………43 七．综述…………………………44 2 万方数据 1，25(OH) D 对系统性红斑狼疮患者 T 淋巴细胞亚群 2 3 的免疫调节作用及临床意义 摘 要 目的 探讨 1,25(OH) D 对系统性红斑狼疮（SLE）患者 T 淋巴细胞亚群的 2 3 免疫调节作用。 方法 1.所有人均为我院风湿免疫科 2013 年 4 月到 2013 年 11 月的门诊和住 院患者；实验组来自我院住院确诊 SLE 患者共 24 例，诊断依据 1997 年美国 风湿病学会（ACR ）修订的 SLE 分类诊断标准；疾病对照组来自我院确诊类 风湿关节炎（RA ）患者共 12 例，RA 组均符合 2009 年 ACR 和欧洲抗风湿病 联盟（EULAR ）分类标准；健康对照组 13 例；根据 SLE 疾病活动性指数 (SLEDAI)评分 SLEDAl≥10 分表示疾病活动。2.采用密度梯度离心法分离三组 外周血单个核细胞（PBMC ），采用磁珠正选法分离T 淋巴细胞，流式细胞术 9 鉴定 T 淋巴细胞纯度大于 96%，以 1×10 /L 种植于 24 孔板（1.0ml/孔）。（1 ） 分别在实验组、疾病对照组和健康对照组的 RMPI- 1640 体系中加入 1,25(OH) D ，同时设立空白对照组，孵育48 小时后，bioplex 法检测上清液 2 3 中 IL- 1β、TNF-α、IFN-γ 、IL-4 、IL-23 水平。（2 ）RPMI- 1640 体系中加入佛 波酯 (PMA)/ 离 子霉素 (Ionomycin) 以建立 Th17 细胞培养体系， 加入 1,25(OH) D ，并设立空白对照组，48 小时后检测上清液中 IL- 17 水平。 2 3 结果