酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6突变株的构建及hxt1基因过表达.pdfVIP

摘要 摘 要 生物质能源是化石能源良好的替代品，乙醇作为比较理想的可再生液体燃料备 受国内外科学家的亲睐。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)作为传统乙醇生产主要 用菌，选育其高产菌株一直是燃料乙醇生产的关键因素。其中，应用重组DNA和 分子改造技术有目的地改变酵母表达调控网络和已有代谢途径，优化细胞代谢机制， 构建优良性状工业微生物显得尤为重要。 本研究依据酿酒酵母本身高效的同源重组机制，应用过表达和基因敲除技术， 增强合成底物代谢利用率，降低或阻遏乙醇分解代谢流，成功构建双基因缺失突变 突变株。取得以下研究进展： l、以adh2基因缺陷型酿酒酵母YS2一△口砌2为出发菌株，应用长侧翼同源两 同源重组，之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中j半乳糖诱导表达Cre重组酶切 低18％，乙醇最高产量提高12．5％。生理特性试验表现为突变株具有很高的遗传稳 定性，生长情况不受影响。 ORF