缺铁水稻根细胞膜泡相关基因群的分析与电镜观察.pdfVIP

维普资讯 第 24卷 第5期 电 子 显 微 学 报 Vol一24．No．5 2005年 l0月 JournalofChineseElectronM icroscopySociety 2005—10 文章编号 ：1000—6281(2005)05—0489—05 缺铁水稻根细胞膜泡相关基因群的分析与电镜观察 印莉萍，罗思羽，闫莉婕 ，常正尧 ，靳 飞，汪洪捷 (首都师范大学生命科学学院，北京 100037) 摘 要 ：在缺铁 固体培养基 中，可清楚地观察到水稻根表面的分泌物和根 的形态变化 以及侧根增多。为 了从分子 水平深入 了解水稻受缺铁胁迫后的反应机理 ，对缺铁水稻根进行 了10531个 EST芯片的微 点阵分析 ，发现膜泡相关 的基 因群相对转录表达率最高。利用超薄切片技术 ，在透射 电镜下观察 了缺铁胁迫下水稻根尖细胞的结构变化。 结果显示：缺铁根尖细胞 中，膜泡好似起源于质膜和囊泡的组装 ，然后在质膜上 凸起 ，并且是双方 向性的。膜泡表 面有衣被 。虽然正常供铁情况下也有膜泡 出现 ，但与缺铁 比较有很大区别。缺铁根尖细胞的膜泡 明显大，膜泡和 凹陷泡上有较清晰的衣被 。同时还观察到在单层膜的膜泡 内有管状和圆球形的内含物质 。内含物 的来源有可能， 至少是部分通过 内吞作 用来 源于细胞 外基质 。 关键词：水稻根；缺铁胁迫；膜泡；超薄切片；透射 电子显微镜 中图分类号 ：s5l】；$435．1】1．3 l5；Q336 文献标识码 ：A 铁作为一种必需的营养元素 ，在农作物代谢中 还出现了新的渗透酶之类的高表达转录本 。这说 的作用已得到详细的研究…。作物的铁营养主要来 明水稻在铁的吸收转运中不是仅采用单一机制 。 源于土壤 ，尽管土壤 中的全铁含量很高 ，但铁的有效 水稻是人类最重要的粮食作物。不能低估铁元 含量却较低 ，特别是 中性和石灰性土壤。铁离子的 素在生物学中的重要性 ，铁对于所有生命体维持胞 溶解度随着 pH值的增加而急剧下降，依次变为水 内平衡都是必不可少的。据 1998年世界卫生组织 合物 (如 Fe(OH))、聚合物 、最终和无机阴离子一起 (WHO)的世 界健康报告 ，1995年 ，全世界 3．6亿人 沉淀下来。铁离子在 pH值为 3．3时溶解度达到 铁缺 乏 ，世 界 30％的人 口由 于铁 缺 乏 而 贫 血 10 M，pH值为7．0时仅为 10 M。然而，植物需要 (wHO2002：http：／／www．who．int／nut／ida．htm)。像南 10 M～10“M的铁 ，因此 当 pH值 7．0，即使通风 亚一些地区，由于水稻对铁的相 对低效吸收导致 铁 较好 的土壤 中可溶性 的铁 也会大大降低 。全世界 营养不 良成为当地人类健康最大的威胁 。因此深入 30％的可利用土地含有石灰，呈碱性土壤 ，因而作物 认识铁的吸收机理 ，为通过生物工程 的方法改造植 缺铁成为较普遍的现象。在长期的演化过程 中，植 物对缺铁胁迫的耐受性及植物对铁的生物利用效率 物发展 出了两套缺铁胁迫适应机制—— 机理 I和机 是非常重要的。 理 Ⅱ。机理 I植物包括双子叶植物和单子叶非禾本 本实验运用芯片技术 (即 cDNA微点阵技术)对 科植物 (拟南芥 、番茄 、豌豆等)，以二价铁方式跨质 幼嫩水稻根基因表达的转录本组进行了分析 ，发现 膜吸收铁离子。机理 Ⅱ植物仅指单子 叶禾本科植 在缺铁胁迫下一批与膜泡运输相关的基 因高效表 物 ，多为作物如小麦 、玉米 、水稻等，它们多以高铁载 达。在超微结构水平上对缺铁 (一Fe)和加铁 (+Fe) 体鳌合三价铁的方式跨质膜