mir-21基治疗联合化疗抑制脑胶质瘤的时序效应研究.pdfVIP

摘要 化疗耐受是恶性脑胶质瘤化疗效果不理想的重要原因之一，本文基于miR-21 抑制剂对化疗耐药相关信号通路的调控机制，以PAMAM树形大分子为基因载 体，分别研究了miR-21基因治疗对替莫唑胺、盐酸阿霉素和紫杉醇化疗的增敏 效果，并研究了时序性联合用药对胶质瘤细胞抑制效果的影响。原位杂交结果表 明PAMAM树形大分子可有效介导miR-21抑制剂在胶质瘤细胞内的转染，显著 联用后分别使替莫唑胺、盐酸阿霉素和紫杉醇三种药物的IC50值降低2到3倍。 胞的抑制效果，发现对前者同时用药时miR-21抑制剂和化疗药物表现出最强的 协同作用，而对后者同时用药时则表现为弱的加和作用，当miR-21抑制剂和化 疗药物间隔4小时用药时表现出协同作用。 为研究miR-21抑制剂和化疗药物联合用药时抑制胶质瘤细胞的时效机制， 种不同遗传背景的胶质瘤细胞系，分析了miR-21抑制剂和替莫唑胺联用时细胞 耐药相关信号转导通路的变化及与抑瘤效果的关系。原位杂交和荧光定量PCR 结果分析证明联合用药时三种细胞系的增殖与其miR-21的表达呈负相关，流式 细胞分析和WesternBlot检测表明联合用药诱导的促凋亡的能力依赖STAT3的 状态，即无论哪种细胞系，当STAT3被miR-21抑制剂或替莫唑胺调控至最低表 达水平时，两药联合对胶质瘤细胞的抑制作用最强。 总之，本文的研究表明联合miR-21抑制剂和化疗药物是抑制脑胶质瘤的有 效方法，但是对细胞的最佳抑制效果受时序的影响。而且我们的研究为肿瘤治疗 中利用信号通路来达到靶向治疗提供了依据。 关键词：胶质瘤，MiR-21抑制剂，化疗增敏，时序用药，STAT3 ABSTRACT orresistancehas beena inthetreatment insensitivity major Drug always problem of of isto the of chemosensitivity glioma．Thepurposepresentstudy investigate miR-21 inhibitorto cellsandthe effectsof glioma sequence—dependentcytotoxic mechanisms combinationofmiR-21 inhibitorwith on chemotherapeuticdrugs，based ofmiR-21 in ofresistance-related PAMAM regulation signalingpathways．Byusing with dendrimeras 1 inhibitorwascombined vector,miR-2 temozolomide(TMZ)， totreat cells．The doxorubicin(DOX)respectivelyglioma paclitaxel(Tax01)and PAMAMcould mediatethe resultsofIn·situ showedthat hybridization