《JNK通路介导人肝癌耐药细胞株Bel-7402／FU多药耐药的调控机制.》.pdf

肿瘤2014年 1月第34卷第 1期 TUMORVo1．34，January2014 WWW．tumorsci．org 19 DOI：10．37818．issn．1000—7431．2014．01．004 Copyright~ 2014byTUM OR 基础研究 ·BasicResearch JNK通路介导人肝癌耐药细胞株Bel一7402／FU多药耐药的调控机制 黄 灿 一，许杜娟。，居 靖 ，夏 泉。，王 猛 1．安徽医科大学附属安庆医院药剂科，安徽 安庆 246000；2．安徽医科大学药学院，安徽合肥 230032；3．安徽 医科大学第一附属医院药剂科，安徽 合肥 230022 【摘要 】 目的：探讨C-Jun氨基末端激酶 (C-JunN—terminalkinase，JNK)信号转导通路对人肝癌 5一氟尿嘧啶 (5一fluorouracil，5一FU)耐药细胞系Bel一7402／FU产生多药耐药 (multidrugresistance，MDR)的调控作用，为肝癌 细胞MDR机制的研究提供新靶点。方法：采用蛋白质印迹法检测人肝癌亲本细胞Bel一7402和耐药细胞Bel一7402／ FU中JNK及磷酸化-INK (phospho-JNK，p-JNK)的表达；在Bel一7402／FU细胞中，使用特异性阻断剂SP600125 抑制JNK通路后，采用RT—PCR和免疫细胞化学法分别检测MDR1mRNA和P一糖蛋白 (P—glycoprotein，P—gP) 的表达；FCM 法检测罗丹 明123(rhodanmine123，Rh123)在细胞 内的积聚和外排情况；MTT法检测Bel一7402／ FU细胞对5一FU的敏感性。结果：耐药细胞Bel一7402／FU组与亲本细胞Bel一7402组相比，JNK蛋白的表达无明显变化， 而p-JNK蛋白的表达量明显增加；抑制JNK通路后，Bel一7402／FU细胞中MDR1mRNA表达水平和P一即蛋白的表 达水平均明显下调，Rh123的蓄积明显增加，外排明显减少，且对 5一FU 的敏感性明显增加 。结论：JNK信号转导 通路参与人肝癌耐药细胞株Bel一7402／FU中多药耐药基因MDR1和多药耐药蛋白P—gP的表达，对其耐药起调控作用。 【关键词 】肝肿瘤；多药耐药相关蛋白质类；JNK信号通路；Bel一7402／FU细胞 [中图分类号】 R735．7 [文献标志码】A [文章编号】 1000—7431(2014)01—0019—07 Theregulatorymechanismof]NKsignaltransductionpathway-mediatedmultidrug-resistanceinhuman hepaticcancercelllineBel-7402／FU HUANGCan ，XUDu-juan31JUJing。，XIAQuan，WANGMeng 1．DepartmentofPharmacy，AffiliatedAnqingHospitalofAnhuiMedicalUniversity，Anqing 246000，AnhuiProvince， China；2．SchoolofPharmacy，AnhuiMedicalUniversity，Hefei230032，AnhuiProvince，China；3．Departmentof Pharmacy，FirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230022，AnhuiProvince，China [ABSTRACT] Objective：ToinvestigatetheregulatoryeffectofC-JunN—terminalkinase(JNK)signal transductionpathwayonmulti—resistanceinthehumanhepaticcancerBeI一7402／S—fIuorourac_I(FU) cells．andprovideapossiblenoveItargetforstudyonthemechanism Ofmultidr