昆虫脂肪体细胞体外增殖方法和同源病毒敏感脂肪体细胞系建立研究.pdfVIP

昆虫脂肪体细胞体外增殖方法研究以及七株昆虫脂肪体细胞系的建立 发现该细胞在虫体内增殖缓慢，4d内少有增殖；脂肪体组织在体外贴壁培养后，组织块 内部的细胞不增殖，而游离出组织块处于培养液环境中的细胞DNA合成活跃，可以大 量增殖． 研究结果表明，选取昆虫末龄幼虫或预蛹完整的脂肪体组织，以物理的手段促使体 外培养的组织块紧密接触培养器皿表面，以及小心处理最初几次传代的过程，是利用昆 虫脂肪体组织为细胞来源、从原代培养进入到传代培养、最终成功建立细胞系的关键； 5-BrdU掺入法标记初步研究的结果显示，从脂肪体组织块中游离出的细胞，可能是大 量分裂增殖而形成细胞系的主要来源，为昆虫细胞体外增殖规律和细胞成系机制的研 究，提供新的方法和思路。本文的研究结果为建立新的昆虫细胞系提供技术上的支持和 借鉴，也可能使建立新的昆虫细胞系成为一种常规的实验室技术。另外，本研究中新建 立的7株具有自主知识产权的鳞翅目昆虫细胞系，不仅丰富了有限的昆虫细胞系资源； 而且因其对各自同源的核型多角体病毒敏感，拓展了其研究和应用的价值，可以成为研 究昆虫病毒、构建杆状病毒表达载体系统以及大规模生产昆虫病毒杀虫剂的有效工具。 关键词；昆虫脂肪体，细胞增殖，建立方法，细胞系，核型多角体病毒 Ⅱ